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LAS对草金鱼毒性效应研究 　　摘 要：本试验的试验鱼为草金鱼，通过采用静水式试验，研究了十二烷基苯磺酸钠（LAS）对草金鱼的急性毒性影响；并在急性毒性试验的基础上，研究了亚急性条件下LAS对草金鱼肝脏组织超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响，初步探讨了LAS对草金鱼的毒性效应。LAS对草金鱼的急性毒性试验结果表明，在水温（15.0±1.0）℃条件下，LAS对草金鱼的毒性较强，24h，48h，72h，96h的半致死浓度（LC50）分别是12.2mg/L，9.8mg/L，8.8mg/L，8.6mg/L。在LAS浓度为2.2，2.9，3.6，5.7，7.9mg/L的亚急性条件下暴露96h，试验结果表明，LAS质量浓度低于3.6mg/L时，LAS对肝脏中SOD酶活性表现出激活作用；LAS浓度高于3.6mg/L时，LAS对肝脏中的SOD酶活性表现出抑制作用。 　　关键词：草金鱼；十二烷基苯磺酸钠；半致死浓度；超氧化物歧化酶（SOD） 　　随着经济发展，人们生活水平的提高，各种洗涤剂被广泛应用于工业、农业、医药等领域，每年消耗量巨大。洗涤剂的重要组成成分是表面活性剂，十二烷基苯磺酸钠（LAS）是目前使用最普遍的阴离子表面活性剂。阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠（LAS）随着生活污水和工业废料等大量排入自然水体，造成水生生物不能正常生长，破坏了水体环境的生态平衡。十二烷基苯磺酸钠（LAS）作为水体中的常见污染物，已被列为《城镇污水处理厂污染物排放标准》（GB18918-2002）的基本控制项目。尽管十二烷基苯磺酸钠（LAS）在水体中易生物降解，但是LAS在环境中的吸附、沉淀和生物降解等迁移行为十分复杂。已有研究表明，LAS在环境和生物体内有累积，在低浓度条件下对鱼类产生慢性毒性。河流和湖泊中的表面活性剂污染十分严重，对渔业和人们的生活健康具有潜在危害。因此研究阴离子表面活性剂（LAS）对鱼类的毒性效应十分必要。 　　水生生物毒性试验在研究水体中化学污染物的环境效应方面有着重要作用。鱼类作为对水中发生的各种物理、化学和生物性的变化反应十分灵敏的一种水生生物，是水生生物毒性试验经常选取的受试对象之一。表面活性剂对鱼的急性毒性研究和对鱼的各项生理指标的影响不断被报道，研究结果表明表面活性剂对鱼类有较大毒性，会对鱼的生理指标产生影响[1-2]。目前，从分子水平研究水中污染物对鱼体内酶、蛋白质等生化反应的影响，用于判断污染物对鱼的毒性作用和探究污染物对鱼的致毒机理成为毒性试验研究的新方向[2-5]。超氧化物歧化酶（SOD）是生物体内重要的抗氧化酶，其主要作用是清除生物体内的自由基。它通过催化反应2O2-+2H+→H2O2+O2可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢，随后过氧化氢被体内的过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）立即分解为无害的水。超氧歧化酶（SOD）其活性随污染物的胁迫作用而发生改变，可以间接反映环境中有毒有害物质对鱼的毒性效应[5]。目前，阴离子表面活性剂（LAS）对鱼的毒性研究选取的鱼有草鱼、彭泽鲫等，但是?离子表面活性剂（LAS）对具有一定观赏价值，经济效益高的草金鱼的毒性研究还鲜见报道。 　　因此，本研究以草金鱼为试验对象，通过急性毒性试验研究LAS对鱼类产生毒害作用的表现，找出产生不良影响的阈浓度。为进一步研究阴离子表面活性剂对草金鱼的毒性机制，本试验以SOD活性变化为评价指标，通过采用暴露实验法，研究在亚急性条件下阴离子表面活性剂对草金鱼肝脏组织中SOD活性的影响，目的是为了利用鱼体内的酶活性变化来评价阴离子表面活性剂对水生生物的毒性效应，为水环境中该类化合物污染的早期预报和防治提供参考依据。 　　1 试验材料与方法 　　1.1 试验材料 　　本试验受试鱼为草金鱼，从郑州市荥阳市王村镇北黄河滩养殖场购买，平均体长为3.4cm，平均体重为1.2g。试验用的草金鱼是从养殖场运到实验室的鱼苗，首先用自来水将鱼苗驯养7天，自来水需经曝气脱氯24h才能使用。驯养水温为（15±1.0）℃（预试验与正式试验水温与驯养时相同），pH为7.0～8.0，溶解氧为9.0mg/L，驯养水水质符合鱼的生活水质要求。驯养期间需喂食和换水。喂食频率为两天一次，定时喂取，换水频率为一天一次。期间及时清理鱼屎并捞出死鱼。试验前1d和试验期间不再喂食和换水。 　　试验所用表面活性剂为十二烷基苯磺酸钠，纯度为分析纯，分子式C18H29NaO3，相对分子质量348.48，天津市凯通化学试剂有限公司。SOD试剂盒购自南京建成生物工程研究所，LAS测定方法采用混合指示剂程序加入法（MIST法）。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 急性毒性试验 　　正式试验前应首先进行预备试验[6]，根据预备试验方法确定鱼的全存活和全致死LAS浓度，从而确