实验40 溶血黄疸脂血对血清肌酐测定的干扰评价ppt课件.pptVIP

实验 40 溶血、黄疸、脂血 对血清肌酐测定的干扰评价;实验目的 ;肌酐（creatinine，Cr）是肌肉组织中肌酸和磷酸肌酸代谢的最终产物。肾功能受损时，肾小球滤过率降低，肌酐的正常排泄受阻，致使血清中肌酐含量增加，是灵敏反应肾小球滤过功能的指标。 肌酐检测常见的干扰因素： 溶血 黄疸 脂血 干扰因素的存在直接影响检测结果的准确性;一、“配对差异”实验方案;1. 测试组和对照组在同一个分析批内完成； 2. 计算重复测量次数 ： 有临床意义的最小差异值 假设检验水准 重复性（批内精密度） ;1. 基础标本（Base pool） 从几个健康的、没有进行药物治疗的个体获得适当类型（血清、尿等）的新鲜样本或冰冻、冻干标本。 2. 测试标本 按照干扰物浓度要求，在基础标本中添加一定量的干扰物贮存液作为测试标本。 ;3. 对照样本 用制备贮存液相同体积的溶剂替代测试干扰物，其他要求与测试样本相同。 4. 贮存液 获得合适而纯的潜在干扰物，或者该物质最接近体内循环状态的形式。 选择一种能够充分溶解分析物的溶剂。 ;1) 合适的分析物浓度； 2) 建立有临床意义差别的标准（dmax ）； 3) 确定每个样品所需的重复测量次数；? 4) 准备临床基础标本； 5) 准备20倍的浓缩贮存液（潜在干扰物），如果使用另外一种浓度）确定，按照步骤6和8稀释;;6) 用吸管吸取1/20容器体积的浓缩贮存液到容量瓶中，称为测试样品， 7) 用基础液补足到刻度体积，充分混匀； 8) 用吸管吸取1/20容器体积的制备贮存液的溶剂到第二个容量瓶，称为对照样品。 9) 基础液补足体积，充分混匀； 10) 准备能够被n整除的测试样本和对照样本，重复测定次数n由第三步确定；;11) 按交互的顺序分析测试(T)和对照(C)样本； 如: C1T1C2T2C3T3…CnTn 如果检测系统受携带污染影响，增加额外的样本使对照样本免受来自测试样本携带污染的影响。如：1T1CxCxC2T2CxCxC3T3…CxCxCnTn 增加的额外对照样品Cx结果应舍弃。 12) 记录结果，进行数据分析。 ;二、“剂量效应”实验方案; 当一种或多种分析物的浓度出现干扰效应，则可通过剂量效应曲线确定不同干扰物浓度干扰程度，干扰物不同浓度可通过最高值干扰物浓度样本和对照样本混合制备。;1. 基础标本 2. 贮存液 3. 高浓度样本 用基础标本稀释贮存液，制备成所需的浓度。 4. 低浓度样本 准备一组低的含平均浓度的干扰物的临床样本，在大多数情况下，治疗药物，或血红蛋白、胆红素可以忽略不计。;5. 测试样本 制备一系列不同浓度的干扰测试样本，通常五个浓度足够确定一个线性的剂量效应关系。;1) 测定待测的最高和最低标本浓度水平； 2) 确定被认为“有临床意义”差别，如果曾做过“配对差异”实验，这一步已经完成； 3) 确定在每个浓度重测次数，通常3次； 4) 准备高中低系列浓度样本，并根据重复次数准备样本量；;6）在同一分析批之内检测5个样本的浓度，第一组按照升序测定各样本，第二组按降序测定，第3组按照升序等等，平均系统漂移影响；或按随机顺序检测所有样本，达到最小化漂移效应； 7）计算低浓度样本的平均值，其他各组结果中减去该低浓度样本的平均值，然后把最终净结果填入表格中进行数据分析。; 将结果点在图上，y轴为干扰结果，x轴上为干扰物浓度，观察剂量效应关系曲线的形状： 线性效应 非线性效应;线性剂量效应回归分析;非线性剂量效应回归分析;三、“用病人标本作偏倚分析”实验方案;被评价的方法和参考方法（或者其他被认定合格的比较方法）同时测定两组病人样本（测试组和对照组），如果测试组与对照组结果出现有意义的偏倚，存在干扰。 参考方法或比较方法对干扰物有低敏感性;测试标本的选择原则 疾病（例如，来自心脏病、肝病或肾病病人的标本）； 药物（例如，使用过某种想了解的药物的病人标本）； 其他不正常组分（例如，具有不正常胆红素、脂质、血红蛋白或蛋白的标本）。;