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③接种可疑菌后,35℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是________________,对照组试管中应加入___________,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_________(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。 ④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有____________________。 细菌大量繁殖 等量生理盐水 低 吞噬细胞、浆细胞 考纲能力 探究实验设计能力 考题2 氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。 考题链接 2.选择培养基的用途 图1 (1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1%的________。 (2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是__________________。 (3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于________培养基和________培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是________。 (4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为________。 琼脂 后灭菌 通用 选择 硝酸铵 芽孢 先调pH, (5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲线(如图2)。从图2可知,SP1菌在_____________培养条件下最早停止生长,其原因是________________。 20 mg/L氯苯 碳源最早耗尽 解析 配制固体培养基时应在液体培养基的成分中再加入琼脂作为凝固剂。在配制培养基时应先调节pH,后进行灭菌,防止灭菌后在调节pH的过程中污染培养基。据表可知,培养基Ⅰ为牛肉膏蛋白胨培养基,包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子,适用于多种微生物的培养。培养基Ⅱ不加牛肉膏和蛋白胨,以硝酸铵为氮源,可以选择出以硝酸铵为氮源的微生物,是选择培养基。在营养缺乏、环境恶劣时,微生物可以形成休眠体——芽孢,来度过不良环境。据图2可知,SP1菌在20 mg/L氯苯培养条件下菌体数最早达到最大值,即最早停止生长,原因是在培养基Ⅲ中,氯苯是唯一碳源,由于20 mg/L氯苯培养条件碳源最少,因此也最早被耗尽,使SP1菌停止生长。 典例 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是( ) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥ C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤ 易错警示 将消毒和灭菌混为一谈 错因分析 对酵母菌酿酒的条件模糊不清。 解析 培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。 答案 A 纠错笔记 条件 结果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法和化学药剂消毒法 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 提醒 (1)高温加热灭菌,其原理就是使细菌体内蛋白质变性,而达到杀灭细菌的作用。 (2)化学药剂的灭菌消毒方法,其作用原理是使细菌体内蛋白质变性,但是化学物质很难透过孢子或芽孢的坚硬外层进 入细胞内,因此化学方法难以消灭孢子和芽孢。 (3)体积分数为70%的乙醇杀菌效果最好。浓度过低,杀伤力弱;浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其内,杀菌效果受影响。对刚洗刷后未干的器皿则可选择75%的酒精进行消毒。 (4)灭菌的目的:无菌技术除了用来防止实验室的培养物受其他外来微生物污染外,还能有效避免操作者自身被微生物感染。 (5)培养基的制作是否合格的验证:如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2天后无菌落生长,说明培养基的制备是合格的,否则需要重新制备。 第十一单元 生物技术实践 第 42 课时 微生物的培养与应用 突破考点·提炼方法 考点1 生物技术手段——微生物实验室培养 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理性质
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