电离辐射的细胞效应课件.ppt

(2)片段化DNA的定量： 方法为：细胞在低渗缓冲液作用下高速离心，上溶液中含有酶解的低分子量DNA，沉淀中含高分子量DNA，分别用二苯胺显色，比色法定量。计算出片段化DNA所占百分比。 4、流式细胞术 5、酶学标志 凋亡细胞除核酸内切酶活化外，蛋白酶和谷氨酰胺转移酶等也被激活。 6、凋亡细胞的原位标记 由于凋亡细胞DNA降解产生缺口和3’—0H，故可以用原位缺口翻译或末端标记法显示凋亡细胞。 2、细胞凋亡的分子调控 DNA损伤 细胞因子 P53 触发 CED-3/ICE蛋白酶 Bax Bcl-2 激活 细胞凋亡 3、辐射所致细胞凋亡的生理控制 1）引发性刺激 IR→细胞表面的受体或其他分子→DNA链断裂、修复 2）滞后（log)阶段的调节 辐射和细胞凋亡发生之间的一段时间 不同的细胞之间这种滞后时期长短不一 发生在滞后期的分子事件包括DNA修复、基因的表达、分化、蛋白质的合成，以及效应蛋白的激活。 癌基因表达，能影响细胞凋亡的进程以及细胞对辐射刺激的敏感性。 3）死亡反应 辐射诱发的细胞凋亡，在经历了滞后阶段后，还要发生一系列特征性生物形态学的改变以及生物化学变化。先是染色质固缩成一团，紧贴着核膜，接着DNA链断裂，在7～15h后，细胞凋谢变得不可辨认，最后被吞噬。 第四节 细胞存活的剂量－效应关系 一、细胞存活的