5―氟尿嘧啶对小麦白菜和水稻生理生化特性影响.docVIP

5―氟尿嘧啶对小麦白菜和水稻生理生化特性影响 　　摘要：在前期获得5氟尿嘧啶对小麦、白菜和水稻种子萌发的急性毒性数据的基础上，研究5-氟尿嘧啶（2.5～100 mg/kg）对小麦、白菜和水稻幼苗叶片中叶绿素、可溶性蛋白和主要抗氧化酶活性的影响。结果表明，短时间暴露时（7 d），5-氟尿嘧啶对3种作物幼苗叶片中叶绿素和可溶性蛋白含量表现为低浓度促进高浓度抑制，超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性也受到不同程度的诱导，对5-氟尿嘧啶表现出一定的抗性；长时间暴露时（21 d），3种作物幼苗叶片中叶绿素和可溶性蛋白含量下降，与5-氟尿嘧啶浓度表现出明显的剂量-效应关系，SOD、POD和CAT活性也不同程度地受到了抑制，抗氧化防御功能降低。本研究结果可为环境中5-氟尿嘧啶的生态风险评估提供基础数据。 　　关键词：5-氟尿嘧啶；生理生化；叶绿素；可溶性蛋白；抗氧化酶 　　中图分类号： X820.4 文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2016）09-0465-04 　　随着现代环境分析技术水平的提高，药品类污染物在环境中的频繁检出引起了科学工作者对其生态风险的广泛关注[1-2]。5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil）是一种常用的抗癌药，主要用于乳腺癌和消化系统癌等癌症的治疗。5-氟尿嘧啶经注射或口服进入人体后，60%～90%可被人体代谢排出，剩余10%～40%则以母体化合物的形式进入医院废水或市政废水中[3]。根据资料预测，污水处理厂出水中5-氟尿嘧啶的浓度可达到23 mg/L[4]。而且，随着门诊病人的增多，水环境中的抗癌药浓度有升高的趋势[5]，因此5-氟尿嘧啶的生态毒性效应逐渐受到重视。 　　已有不少学者研究了5-氟尿嘧啶对不同的生物的生态毒性效应。如Zounkova等研究发现，5-氟尿嘧啶对恶臭假单胞菌生长（Pseudomonas putida）的EC50值为0.027 mg/L，对近头状伪蹄形藻（Pseudokirchneriella subcapitata）的EC50值为0.11 mg/L，对绿藻（Desmodesmus subspicatus）的EC50值为48 mg/L，对大型蚤的EC50值为36 mg/L[6-7]。Deyoung等发现5-氟尿嘧啶对黑头呆鱼（Pimephales promelas）生长的EC50值为400 mg/L[8]。恽烨等研究发现5-氟尿嘧啶对小麦（Triticum aestivum）、白菜（Brassica pekinensis）和水稻（Oryza sativa）种子的根伸长半数抑制浓度分别为212.80、102.53、13.30 mg/L[9]。 　　现有的生态毒性数据表明，5-氟尿嘧啶不太可能引起急性毒性效应，但是生物长期暴露于低浓度的抗癌药胁迫中，是否会引起生理生化等方面的影响还未可知。因此，本试验以小麦、白菜和水稻为受试生物，通过研究低浓度5-氟尿嘧啶长期胁迫对小麦、白菜、水稻的叶绿素和抗氧化酶系统的影响，为5-氟尿嘧啶的生态风险评价提供基础数据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　试验药品5-氟尿嘧啶纯度为99%，购于北京百灵威科技有限公司。 　　供试种子为小麦（Triticum aestivum），偃展4110；白菜（Brassica pekinensis），青杂改良三号；水稻（Oryza. sativa），抗优818。供试种子均购自南京金盛达种子公司。 　　供试土壤采自南京林业大学北大山0～20 cm表土（修休耕地，未受人为污染，属于清洁土壤），pH值为7.23，有机质含量为2.86%，总氮、总磷、总钾的含量分别为1.36、0.02、3.20 mg/kg。 　　1.2 幼苗生理生态毒性试验 　　称取200 g风干土壤于95 mm×60 mm×70 mm（上口直径×下底直径×高）的塑料花盆中（盆底铺1层滤纸），采用土壤染毒法将配制好的5-氟尿嘧啶溶液按水土比1 ∶5投加到土壤中，置于恒温光照培养箱中，（25±1） ℃下暗平衡48 h。选取饱满、均匀的小麦、白菜和水稻种子，灭菌消毒后用镊子播种于土壤中，每盆15粒种子，调节水土比1 ∶5，置于恒温光照培养箱中培养，光―暗周期为12 h―12 h，恒温（25±1） ℃，早晚各浇水1次。5-氟尿嘧啶试验浓度为2.5、5.0、10.0、50.0、100.0 mg/kg，同时设置空白对照，每个处理3组平行，在培养的7、14、21 d分别采样进行分析测定。 　　1.3 生理生化指标测定方法 　　叶绿素（Chlorophyll，Chl）的测定采用95%乙醇浸提法[10]。称取0.05 g作物幼苗叶片剪碎至刻度试管中，加入10 mL 95%乙醇，使