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427例乙型肝炎患者血清标志物检测结果分析 　　摘 要： 乙肝严重危害着人类的生命与健康，寻找更为敏感准确的检测指标对乙肝患者的诊断和预后具有十分重要的意义。本文抽取427例病毒性肝炎患者的血清标本，分别采用ELISA和RT-PCR两种方法检测对乙型肝炎病毒血清标志物HBV-M、HBV-DNA、Pre-S1进行检测，结果显示HBV-DNA（83.1%）、Pre-S1（73%）有较高的阳性检出率，可以作为更敏感的血清标志物，与传统的“乙肝两对半”进行联合应用，以更好的进行乙肝患者的早期诊断和预后治疗。 　　关键词：乙型肝炎 HBV-DNA Pre-S1 HBV-M RT-PCR 　　中图分类号：R446.6 文献标识码：A 文章编号：1003-9082（2016）08-0245-01 　　乙型肝炎是我国常见的传染病之一，严重危害着人类的生命与健康，乙型肝炎病毒是引起乙肝的主要原因，因此乙型肝炎病毒复制和活动情况的判断对乙肝患者的诊断和预后具有十分重要的意义[1]。目前，临床上对乙型肝炎病毒血清免疫学标志物（HBV-M）和乙型肝炎病毒前Sl抗原（Pre-S1）进行测定主要采用酶联免疫吸附法（ELSIA），以此作为乙肝病毒复制和活动情况的判断，但此种方法有其局限性，无法达到较高的阳性检出率；随着分子生物学和生物化学技术的不断发展，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测乙型肝炎病毒基因组（HBV-DNA）被越来越多的应用到医学检验和临床诊断乙型肝炎，其检测结果可以达到更高的阳性率[2-3]。 　　本文抽取427例病毒性肝炎患者的血清标本，分别采用ELISA和RT-PCR两种方法针对乙型肝炎病毒标志物水平进行检测，主要包括HBV-DNA、Pre-S1和HBV-M，并对检测结果进行分析比较，判断更敏感的乙型肝炎病毒标志物，用于更好的指导临床诊断及治疗。 　　一、临床资料 　　1.一般资料 　　427例病毒性肝炎患者，选自2014年1月至2015年7月来我院门诊及感染科治疗的病毒性肝炎患者，所有的患者均经临床确诊。其中，男性患者有279例，女性患者有148例，年龄24-66岁，平均年龄为37.8±1.1岁。上述患者都已经排除严重的全身性疾病如心、肾功能不全以及血液性疾病等情况。 　　2. 统计学处理 　　所有数据统计分析运用SPSS17.0统计软件处理和数据分析，以α=0.05为检验水准，P0.05为存在差异，并有统计学意义。 　　二、实验方法 　　1.检测方法及仪器设备 　　427例病毒性肝炎患者在空腹条件下抽取6mL的静脉血，然后立即在室温条件下以1500g离心15min分离出血清，将血清于适当的条件下保存，在规定时间内完成HBV-DNA、pre-S1和HBV-M三种指标的测定。采用ELISA检测Pre-S1和HBV-M，其中HBv-M即乙肝五项，包括乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）、乙型肝炎核心抗体（抗-HBc）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎e抗体（抗-HBe），检测试剂盒购自中山生物公司，操作步骤按照说明书进行。另外，采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）法检测HBV-DNA，从血清中提取DNA加入反应管，放入扩增仪进行扩增，反应结束后由电脑自动分析结果；PCR扩增仪购自美国MJ公司，荧光定量HBV-DNA试剂盒购自上海科华生物技术有限公司，反应结束后电脑自动分析结果。 　　2.患者分组及HBV-DNA阳性指标界定 　　按照HBV-M的ELISA检测结果将所有患者分成5组，Ⅰ组（“大三阳”组）为HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性，Ⅱ组（“小三阳”组）为HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性，Ⅲ组为抗-HBs、抗HBe、抗-HBc阳性，Ⅳ组为HBsAg、抗-HBc阳性；Ⅴ组为抗-HBs阳性；未提及者即为阴性。HBV-DNA ≤500copy/mL为阴性，500copy/mL为阳性，阳性检测结果分为3个水平，分别是500-104、104-106、106。 　　3.结果 　　3.1HBV血清标志物ELISA检测结果 　　在427例乙型肝炎病毒标志物检测结果中，HBV-M检测分为五种感染模式，其结果分别为：Ⅰ组所占百分率为29%（124人），Ⅱ组占有率较高，可达42.4%（181人）；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组百分率分别为16.2%（69人）、10.5%（45人）和1.9%（8人），t检验比较组间差异，p0.05，差异有统计学意义。Pre-S1的阳性检出率为73%（312人），其中Ⅰ、Ⅱ组阳性检出率较高，分别是89%、66.4%，与其余组比较，差异显著，有统计学意义。 　　3.2HBV-DNA实时荧光定量PCR检测结果 　　HBV-DNA的阳性率为