最新研究重组人细胞介素演示文稿4.pptVIP

白细胞介素 定义 1.由白细胞分泌的一类调节细胞生长、分化和免疫活性的细胞因子。（狭义） 2.一组由多种类型细胞所分泌的、结构和功能各异的可溶性蛋白，参与细胞间信息交换，目前已发现IL-1~IL-33。（广义） 3.一般具有多来源、多功能和多作用途径的特点。其立体结构有β三叶草型、4-螺旋束型和 β三明治型等。信号转导方式有胞外因子-受体复合体相互作用和胞内信号传递途径等。 2.用法用量 （2）.区域与局部给药 胸腹腔注射：30万—l00万国际单位； 肿瘤灶局部给药：根据瘤体大小决定用药剂量。一般剂量为一次20万国际单位(IU)。 注：药物采用氯化钠溶解。 (2).功效 1.用于肾细胞癌、黑色素瘤、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、直肠癌、淋巴癌、肺癌等恶性肿瘤的治疗，用于癌性胸腹水的控制，也可以用于淋巴因子激活的杀伤细胞的培养。 2.用于手术、放疗及化疗后的肿瘤患者的治疗，可增强机体免疫功能。 3.用于先天或后天免疫缺陷症的治疗，提高病人细胞免疫功能和抗感染能力。 4.各种自身免疫病的治疗，如类风湿性关节炎等。 5.对某些病毒性、杆菌性疾病、胞内寄生菌感染性疾病，如乙型肝炎、麻风病、肺结核等具有一定的治疗作用。 2.用法用量 （1）.全身用药： 1)皮下注射：重组人白介素-2（125 Ala）60－100万IU/m2，皮下注射3次/周，6周为一疗程。 2) 静脉注射：40～80万U/m2加生理盐水500ml，滴注时间不少于4小时。 3) 介入动脉灌注50～100万IU/次，2～4周一次，2～4次为一疗程 。 2.用法用量 (2).区域与局部用药： 1)胸腔注入：用于癌性胸腔积液，重组人白介素－2（125 Ala）100～200万IU/m2次，尽量抽去腔内积液后注入。 2)肿瘤病灶局部给药：根据瘤体大小决定用药剂量，每次用量不少于10万IU，隔日一次,4～6次为一疗程。 2.用法用量 1.全身用药： 1)皮下(或肌肉)注射：重组人白介素-2(Ⅰ)20-100万国际单位/次，加2毫升无菌生理盐水溶解，皮下(或肌肉)注射，1-2次/天。 2)静脉注射：60-200万国际单位/次，加无菌生理盐水500毫升，滴注时间不少于4小时。 3)介入动脉灌注：100-200万国际单位/次。 2.用法用量 2.区域与局部给药： 1)胸腹腔注入：用于癌性胸腹腔积液，重组人白介素-2(Ⅰ)100-300万国际单位/次，尽量抽去腔内积液后注入，2-3次/周。 2)心包积液：心包内注射，200万国际单位/次， 尽量抽去心包积液后注入，1次/周。 3)肿瘤病灶局部给药：根据瘤体大小决定用药剂量，10-20万国际单位/次，隔日一次。 * * * 重组人白细胞介素-2 Recombinant Human Interleukin-2 赵丽娜 李文生 20094710140 生物技术1班 主要内容 一、作用用途 二、生产制备 三、药物信息 四、注意事项 五、发展前景 一、作用用途 为多肽类免疫增强剂，是一种淋巴因子。 刺激B细胞增殖分化和分泌抗体，也用于先天或后天免疫缺陷症的治疗。 诱导干扰素和多种细胞因子的分泌 用于肿瘤辅助治疗和癌性胸、腹水的治疗。 也可各种自身免疫病的治疗，如类风湿性关节炎等。 对乙型肝炎、麻风病、肺结核、白色念珠菌感染等具有一定的治疗作用。 二、生产制备 生产制备的方式主要有两种： 1、传统工艺制备 2、基因工程制备 其中以第二种方法为主 传统工艺流程 鸡瘟病毒，PHA,培养液 [启动诱生] 37℃ 人白细胞粉 诱生白细 胞培养液 [灭活病毒，分离],HCl,NaOH pH = 2~2.5,pH = 7.2~7.4,离心 上清液 35%硫酸铵 4 ℃，24h，离心 上清液 85%硫酸铵 4 ℃，24h，离心 沉淀 10mmol/LPBS透析 pH = 6.5，24h 透析内液 [亲和层析] 上Sepharose柱 pH = 6.5 亲和载体I [洗涤] 0.4mol/LNaCl，PBS pH = 6.5 亲和载体Ⅱ [吸收] 1.0mol/LNaCl,PBS透析 pH = 6.5 IL-2组分 [凝胶层析] 上Utrogel柱 pH = 6.5 凝胶载体 0.2mol/Ltris-HCl含0.1%PEG 2%正丁醇，0.2mol/L甘氨酸 pH = 7.6 IL-2 基因工程制备流程 IL-2 cDNA 文库的构建 IL-2表达 利用mRNA杂交筛选 IL-2 cDNA克隆 与质粒载体pLY-4连接，并转入大肠杆菌 纯化的IL-2 制备包涵体，并用凝胶过滤层析纯化 cDNA文库的构建 IL-2mRNA 逆转录酶 逆转录成单链cDNA 末端