HIF1α和VEGF在胶质瘤中表达及意义.docVIP

HIF1α和VEGF在胶质瘤中表达及意义 　　【中图分类号】R739.41【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2014）06胶质瘤的生物学行为主要表现为脑内局部侵袭性生长，尽管手术切除以及化学治疗和放射治疗方案已一定程度改善患者症状及预后，但其的侵袭性生长和复发是胶质瘤临床治疗失败的主要原因。肿瘤生长过程中，普遍存在缺氧的微环境改变，而新生血管的形成也发挥着重要作用。本研究通过应用免疫组织化学方法检测胶质瘤肿瘤组织中缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）、血管内皮生长因子（vescular endothelial growth factor，VEGF）的表达情况，并分析其与临床病理学的关系。 　　1 材料与方法 　　1.1材料 　　收集秦皇岛市第一医院1998年1月-2012年12年98例胶质瘤手术标本98例。年龄范围从11岁至73岁，平均年龄43.7岁。其中男性57例，女性41例，男女比例1.39:1。标本均经10%福尔马林固定、石蜡包埋、5μm切片，光镜观察。病理分级及组织类型参照WHO2003神经上皮肿瘤分类标准，选取Ⅱ～Ⅳ级病例，其中Ⅱ级45例，Ⅲ级29例，Ⅳ级24例，星形细胞瘤81例，少突胶质细胞瘤12例，室管膜瘤5例。 　　1.2主要试剂 　　鼠抗人单克隆HIF-1α和即用型VEGF抗体、MaxVisionTM快捷免疫组化染色试剂盒、DAB显色试剂盒均购于福州迈新公司，所有步骤均按照试剂说明书规范操作。以PBS代替一抗作阴性对照。 　　1.3结果判定 　　在肿瘤细胞胞膜、胞浆出现棕黄色颗粒判定为阳性。HIF-1α表达于细胞核，VEGF表达于胞浆。高倍镜下每张切片随机选择5个视野，每个视野计数200个细胞，计算阳性细胞占同类细胞的百分数：细胞阳性率分为10%为阴性、≥10%为阳性。 　　1.4 统计学分析 　　采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。计数资料组间比较采用χ2检验分析。HIF-1α和VEGF之间的相关性采用Speaman等级相关分析。 P＜0.05表示差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1HIF-1α在胶质瘤中的表达 　　HIF-1α在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中的阳性率分别为20.1%、25.2%、53.3%，Ⅳ级胶质瘤的HIF-1α阳性率明显高于前两个级别胶质瘤的阳性率，结果有显著性差异（χ2＝17.706，P＜0.05）。HIF-1α表达形式为在肿瘤细胞异型显著区域、坏死区周围以及肿瘤和正常组织交界处表达较多。 　　2.2 VEGF在胶质瘤中的表达 　　VEGF在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中表达的阳性率分别为38.3%、80%、83.3%，Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤VEGF的阳性率明显高于Ⅱ级胶质瘤的阳性率，结果存在显著性差异（P＜0.05），而Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤之间无显著性差异（χ2＝6.929，P=0.031）。VEGF在高级别胶质瘤中染色阳性细胞数多，且胞浆染色强度明显增加。 　　2.3HIF-1α与VEGF表达相关性 　　HIF-1α与VEGF表达呈正相相关（r=0.289，P＜0.05）。见表1. 　　表1 HIF-1α与VEGF表达之间的关系 　　HIF-1α VEGF r p+ -+32 130.2890.001- 18 350.2890.001 　　 　　3讨论 　　缺氧是实体肿瘤生长环境的一个共同特征，HIF-1则处于肿瘤缺氧的中枢位置。HIF-1α是普遍存在于实体肿瘤组织中的缺氧应答调控因子，在多数恶性肿瘤中高表达，并在促进新生血管形成及发生侵袭生长等生物学行为中发挥重要作用［1］。HIF-1α是调节肿瘤细胞适应低氧的关键转录激活因子，可以与缺氧反应元件结合诱导多基因表达，从而促进肿瘤发生浸润和转移［2,3］。VEGF是迄今为止鉴定出来的最重要的血管生长因子，是受HIF-1α调控的下游因子，新血管生成是恶性肿瘤局部浸润性生长和转移的形态学基础。HIF-1α可通过调控编码VEGF基因使其高表达，主要是通过特异的过程使VEGF的mRNA稳定增加，增加VEGF的转录活性从而促进新生血管形成，给肿瘤生长和侵袭创造条件［4］。有研究表明乳腺癌、肝细胞癌中HIF-1α过度表达与肿瘤血管生成密切相关，HIF-1α可刺激肿瘤血管生成。HIF-1α和VEGF的高表达提示肿瘤的TNM分期高、预后差、淋巴结转移率高及生存率低［5,6］。 　　本研究表明，HIF-1α的表达随着胶质瘤病理级别的增高而升高，表明HIF-1α的表达强度与肿瘤分化程度相关。Ⅳ级胶质瘤HIF-1α表达明显高于Ⅱ、Ⅲ级胶质瘤，产生这一结果主要是Ⅳ级胶质瘤生长更快，通常具有显著的血管增生伴坏死形成。缺氧环境下，环境不能满足肿瘤生长需要，启