WWOX与P53在食管鳞癌中表达及其临床意义.docVIP

WWOX与P53在食管鳞癌中表达及其临床意义 　　[摘要] 目的分析WWOX与P53蛋白在食管鳞癌中的表达，探讨它们与食管鳞癌临床病理特征的关系。方法用免疫组化法检测40例正常食管黏膜、癌旁食管黏膜及癌组织标本的WWOX与P53蛋白产物的表达情况，并结合-临床病理特征进行分析。结果在食管鳞癌组织中，中分化组与低分化组WWOx蛋白阳性表达率、P53蛋白阳性表达率差异均有统计学意义(P0.05)；Ⅱ期与Ⅲ―Ⅳ期间WWOX蛋白异常表达差异有统计学意义(P0.05)，Ⅰ期或Ⅱ期均与Ⅲ-Ⅳ期间P53蛋白异常表达差异有统计学意义(P0.05)；有、无淋巴结转移WWOX蛋白阳性表达率、P53蛋白阳性表达率差异均有统计学意义(P0.05)。食管鳞癌组织中，WWOX蛋白阴性表达与P53蛋白阳性表达呈正相关(Rs=0.514，P0.001)。结论WWOX蛋白与P53蛋白异常表达与食管鳞癌的癌组织分化程度、临床分期及转移有关。在食管鳞癌中WWOX蛋白与P53蛋白表达密切相关。联合检测WWOX蛋白与P53蛋白，可以为食管鳞癌的诊断、治疗及判断预后提供有意义的生物学指标。 　　[关键词] 食管鳞癌；P53；WWOX；免疫组织化学 　　[中图分类号]R735.1　[文献标识码]A [文章编号]1672-4208(2009)11-0001-03 　　 　　WWOX蛋白(WW domain―containing oxidoreduc―tase，WWOX)，即包含氧化还原酶的双色氨酸域基因，是于2000年被发现的一个肿瘤相关基因。P53蛋白是目前发现的与人类肿瘤发病相关性最大的抑癌基因之一。目前，国内、外关于WWOX与P53蛋白在食管鳞癌组织中表达的研究报道较少，并且研究方法及结果也各不相同，因此。本课题探索WWOX与P53蛋白在食管鳞癌中的表达，探讨它们在食管癌的发生机制以及与临床病理特征的关系，为食管癌诊断、治疗、判断预后提供有意义的生物学指标。 　　 　　1　材料和方法 　　 　　1.1 材料 (1)收集茂名市人民医院近三年(2006―2009)年来手术切除的食管鳞癌标本40例，分别取肿瘤组织、癌旁正常组织(距肿瘤边缘2～5cm)及正常食管粘膜组织。所有标本均经病理学检查确诊。其中男性25例、女性15例；中位年龄50岁；癌组织分化程度：高分化2例、中分化21例、低分化17例；TNM临床分期(UICC2002)：Ⅰ期3例、Ⅱ期26例、Ⅲ期10例、Ⅳ期1例；有淋巴结转移18例，无淋巴结转移22例。(2)兔抗人WWOX多克隆抗体工作液：购自上海美季生物技术有限公司；兔抗人P53单克隆抗体工作液，即用型UltraSensitiveTM s―P试剂盒，浓缩型DAB试剂盒，磷酸盐缓冲液PBS(0.01mol/L，pH7.2―7.4)粉剂，均购自福州迈新生物技术公司。 　　 　　1.2　方法　(1)免疫组织化学：采用链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)检测WWOX蛋白和P53蛋白表达，一抗为兔抗人WWOX多克隆抗体、兔抗人P53单克隆抗体。用PBS代替一抗作为阴性对照。(2)结果判定：WWOX染色以细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性；细胞核呈棕黄色颗粒状为突变型P53蛋白阳性表达；按照FDA推荐的Hercep Test评分标准把结果分为+++。+：超过10％的癌细胞染色，染色间断分布；++：超过10％的癌细胞弱到中度阳性，染色连续；+++：超过10％的癌细胞强阳性，染色连续。-为阴性表达，+++为阳性表达。 　　 　　1.3　统计学分析 统计学处理在SPSS13.0软件包上进行。采用PearsonX2检验、spearman等级相关分析，分析WWOX与P53基因蛋白表达水平与食管鳞癌的临床病理特征关系，以P0.05为差异有统计学意义。 　　 　　2　结果 　　 　　2.1 WWOX蛋白的表达与食管鳞癌临床病理特征的关系WWOX蛋白在食管鳞癌组织的阳性表达率为30.0％；在癌旁组织及正常食管组织阳性表达率分别为80.0％及82.5％。在食管鳞癌中，WWOX蛋白阳性表达率明显低于癌旁组织、正常食管组织，差异有统计学意义(P0.05)。见表1。 　　 　　 　　2.2　P53蛋白的表达与食管鳞癌临床病理特征的关系突变型P53蛋白在食管鳞癌组织的阳性表达率为72.5％；在癌旁组织及正常食管组织的阳性表达率分别为37.5％及27.5％。在食管鳞癌中，P53蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织、正常食管组织，差异均有统计学意义(JP0.05)；有淋巴结转移的食管鳞癌组织中，P53蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移者，两组间差异有统计学意义(P0.05)。见表2。 　　 　　 　　2.3　WWOX蛋白与P53蛋白在食管鳞癌中的表达关系食管鳞癌组织