MDM2p53通路在脑胶质瘤中表达及其意义探讨.docVIP

MDM2p53通路在脑胶质瘤中表达及其意义探讨 　　【摘要】 目的 探讨MDM2蛋白、p53在脑胶质瘤的表达及其在肿瘤发生发展中的作用。方法 应用免疫组化技术检测35例胶质瘤组织中MDM2、p53的表达。结果 MDM2、p53在胶质瘤中的表达率分别为17．1%(6/35),45．7%(16/35)。MDM2表达与突变型p53表达呈负相关，Pearson相关系数（r=-0．531）。两者均与胶质瘤病理分型相关，标准回归系数(Beta)值分别为：MDM20．443，p530．74。结论 Mdm2的表达与p53的表达存在负相关，是肿瘤高度恶性的生物学标志。 　　【关键词】 胶质瘤；MDM2；p53 　　 　　【Abstract】 　　Objective To study the incidence ofMDM2 expression in different histopathol- 　　ogical grades of glioma and to investigate the regulatory model of MDM2 in tumor cel1．Methods The surgical specimens from 35 brain glioma patients were analysed to detect MDM2 expression with immunohistochemical method ．Results The incidence of MDM2 expression was 17．1%(6/35) in glioma． There was a positive correlation between MDM2、p53 expression and grade of glioma by using the Speamaan Corelation test to analyse the data．Conclusion There Was a positive correlation between histopathological grades of glioma and MDM2 accumulation，p53 expression．Mdm2 decrease was in accordance with p53 expression．Mdm2 and p53 expression was the biological character of high grade tumor． 　　【Key words】 Gliomas；p53 gene；MDM2 gene 　　 　　脑胶质瘤是临床上颅内肿瘤中最常见的一种，起源于神经外胚层细胞，国内统计占颅内肿瘤的35．12%～61．10%，平均49．17%。大多数胶质瘤病例恶性程度高，侵袭性强，手术不易切除完全，术后复发率高，患者预后不良。近年来，分子生物学的进展为探讨胶质瘤的发生机制和综合治疗提供了新的方向。MDM2是目前研究比较广泛的癌基因之一，在多种类型肿瘤中可以检出。一般认为，MDM2/p53负反馈调节环对p53基因起稳定作用。本研究通 　　过对不同病理类型脑胶质瘤中MDM2、p53表达的检测，分析并探讨其在脑胶质瘤发生中的作用。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1．1 标本 研究涉及脑胶质瘤标本35例，均取自湖南省人民医院神经外科2004~2005年手术切除组织。35例脑胶质瘤病例中，男性19例，女性16例，年龄8～70岁，均为首次确诊，手术前未经化疗、放疗和其他生物免疫治疗。参照Kleihues和Cavenee［1］2000年发表的WHO神经系统肿瘤分类方法组织类型并分级，其中Ⅰ级3例，Ⅱ级10例，Ⅲ级11例，Ⅳ级11例。所有标本均经10%福尔马林溶液浸泡固定，常规石蜡包埋保存。 　　1．2 试剂 一抗分别为1∶100稀释的鼠抗人mdm2单克隆抗体、鼠抗人p53单克隆抗体 (均为Santa Cruz Biotechnology，Inc产品)。用PBS代替一抗作阴性对照； 10％封闭用正常山 　　羊血清、生物素化二抗工作液、抗辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素及DAB显色试剂盒均购自Dako公司。 　　1．3 方法 按免疫组化SP染色法进行。以已知阳性片做阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗做阴性对照。 　　1．4 结果判定 以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性标准，计算标记指数(Label Index，LI)：每张切片于高倍镜下(400×)随即选5个视野，每个视野计数200个细胞，数出阳性细胞数目，换算成百分比。定性判断上，标记指数10%以下为阴性，10%～25%阳性＋，25%～50%为阳性＋＋，50%为阳性?＋＋＋