不同浓度依托咪酯诱导人肝癌HepG2细胞体外凋亡研究.docVIP

不同浓度依托咪酯诱导人肝癌HepG2细胞体外凋亡的研究 　　[摘要] 目的 探讨不同浓度的依托咪酯是否具有直接诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的作用，寻找依托咪酯临床治疗的新途径。 方法 人肝癌细胞株HepG2体外扩增培养备用，选取不同浓度的依托咪酯E1、E2、E3和对照组（空白），分别培养12h、24h、48h后观察。 结果 与空白对照组相比，培养12h、24h、48h后E1组、E2组人肝癌细胞株HepG2细胞凋亡率无明显差异E3组凋亡率不断增加，E1与E3组对比人肝癌细胞株HepG2细胞凋亡率具有显著性差异E2与E3组对比人肝癌细胞株HepG2细胞凋亡率具有明显差异结论 依托咪酯在临床安全有效的浓度下不直接诱导人肝癌HepG2细胞的体外凋亡，浓度及时间达到一定峰值时可具有直接诱导人肝癌HepG2细胞体外凋亡的作用。 　　[关键词] 依托咪酯；HepG2细胞；肾上腺；免疫；细胞凋亡 　　[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）10-24-03 　　[Abstract] Objective To explore the different concentrations of etomidat whether directly induce the cell apoptosis to seek open up new ways of etomidate clinical treatment. Methods Human liver HepG2 cell line were amplificated cultivation for use in vitro， choose different concentrations of etomidate E1， E2 and E3 （blank） as control group.HepG2 were observed respectively after 12h， 24h， and 48h.With liver cancer HepG2 cell lines as target cells. Results Compared with the blank control group， 12h， 24h， 48h after culture E1 and E2 group liver HepG2 cell line apoptosis rate has no obvious difference（P0.05）， E3 group of apoptosis rate increased， and with significant difference （P0.05）， E1 and E3 group compared with liver HepG2 cell line apoptosis rate have significant difference（t=1.864，P0.05），E2 and E3 group compared with liver HepG2 cell line apoptosis rate have obvious difference （t=1.691， P0.05）. Conclusion Etomidate with safe and effective concentrations in clinical are not directly induced HepG2 liver cancer cell apoptosis in vitro， but when concentration and time reach a certain peak can be directly induced the hepatocellular carcinoma HepG2 cells apoptosis in vitro. 　　[Key words] Etomidate； HepG2 cells； Adrenal gland； Immunity； Apoptosis 　　依托咪酯可以直接抑制HL-60的细胞活性，并且诱发该细胞的凋亡，也有相关文献报道依托咪酯对鼠肝线粒体能量代谢有影响，还有对肝脏缺血-再灌注损伤的保护均有作用[1-4]，那么依托咪酯是否也会直接诱发人肝癌HepG2细胞的凋亡呢？我们提出了该研究的假设。本文设计不同浓度的依托咪酯是否具有直接诱导该细胞凋亡的作用，2.1.1 细胞冻存 取1mL的胰酶消化2min后，将对数生长期的细胞从培养瓶表面贴壁冲洗下去，并悬浮于3mL的培养液中，用1000rpm离心5min，去上清液。将人肝癌HepG2细胞悬浮于1mL的冻存液中，调整细胞浓度至106/mL