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两个经典实验教学中常见问题的思考 　　摘 要 针对高中阶段“肺炎双球菌的转化实验”和“噬菌体侵染细菌实验”教学中的常见问题进行探讨，阐述这两个实验在特定的历史背景下所具有的划时代意义。 　　关键词 肺炎双球菌 噬菌体 DNA 遗传物质 　　中图分类号 G633.91 文献标志码 B 　　人教版“DNA是主要的遗传物质”一节内容以基本史实为线索，意图引导学生体验科学探索的历程，领悟科学研究方法。“肺炎双球菌的转化实验”和“噬菌体侵染细菌的实验”是生命科学史上2个著名的经典实验，但中学中不少师生对这两个实验的认识存在着一定的偏差。 　　1 “肺炎双球菌的转化实验”教学中常见的问题 　　“肺炎双球菌的转化实验”教学中最常见的问题是简单地认为该实验证明了DNA是遗传物质。因此“什么是遗传物质？”就成为值得探究的问题。 　　20世纪早期，大多数科学家认为遗传物质是蛋白质。该观点的流行源自科赛尔，他认为决定染色体功能的是蛋白质。此外，科赛尔的学生莱文提出的“四核苷酸假说”认为DNA是一种类似糖原的多聚体，不具备遗传物质中所必需的多样性，不可能作为遗传物质。 　　1928年，英国的格里菲斯报道了一系列有趣的、但又令人迷惑不解的肺炎双球菌转化现象，提出已经被加热杀死的S型细菌中存在转化因子将R型活菌转化为S型活菌的假说。格里菲斯的这一发现激发了一些科学家极大的兴趣，艾弗里就是其中最杰出的一位。早在1933年，艾弗里的同事埃洛维就制备了转化因子的粗提取溶液，只是进一步纯化转化因子很困难。相继的探究中艾弗里、麦克劳德和麦卡蒂发现：用有机溶剂除去提取物中的蛋白质，提取物仍能转化；分别用降解蛋白质的酶和降解RNA的酶处理提取物后对转化无影响。这些实验结果排除了蛋白质和RNA是转化因子的可能性。1943年，在艾弗里实验室工作的麦克劳德和麦卡蒂从S型菌中分离出具有活性的“转化因子”，并鉴定出该物质为“一种高聚合的、黏性的脱氧核糖核酸的钠盐”。1946年，艾弗里及同事发现分解DNA的酶能破坏提取物的转化能力。所有这些结果都暗示了DNA是转化物质。于是，艾弗里得出：DNA是转化因子。这是个颇令人回味的描述。 　　人教版教材介绍“实验结果甚至出乎艾弗里自己的预料，于是艾弗里提出了不同于当时大多数科学家观点的结论：DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质”。可见，教科书也没有简单地描述该实验证明了DNA是遗传物质。 　　尽管艾弗里等提出自己的观点时很谨慎，但仍有一些科学家对艾弗里的观点持怀疑态度，且由于他们从S型肺炎双球菌中纯化出的活性转化因子――DNA，纯度最高时仍含有0.02%的蛋白质。也许正是对艾弗里结论的质疑，促使赫尔希和助手蔡斯进行了著名的噬菌体侵染细菌的实验。 　　2 “噬菌体侵染细菌的实验”教学中常见问题的思考 　　“噬菌体侵染细菌的实验”教学中最常见的问题是简单认为实验结果证明蛋白质没有进入大肠杆菌，而DNA进入大肠杆菌内。 　　噬菌体侵染细菌的部分实验过程如图1所示。 　　赫尔希和蔡斯的实验结果表明，大约75%的噬菌体蛋白质和15%的DNA释放到上清液。多数噬菌体的蛋白质在上清液中，而DNA在沉淀物里，这暗示了噬菌体的蛋白质外壳仍留在外面，DNA进入细菌细胞中。赫尔希和蔡斯进一步研究发现，感染细菌产生的子代噬菌体35S的放射性低于亲代放射性的1%，32P的放射性超过亲代放射性的30%。这表明病毒蛋白作为一种保护层促使噬菌体吸附到细菌上，使得噬菌体DNA能够注射到宿主细胞中。同时，他们又认为由于分离技术的不确定性，不能断言该实验为DNA是遗传物质提供了确凿的证据，需要进一步的研究来确定遗传物质的本质。 　　人教版教材的相关叙述是：“用35S标记一组感染实验，放射性主要分布在上清液；用32P标记一组感染实验，放射性主要分布在沉淀物中……进一步的观察发现：细菌裂解释放的噬菌体中可以检测到32P标记的DNA，但?s不能检测到35S标记的蛋白质。”可见，教材的叙述看似赘述，却是符合事实的。 　　3 后续的相关研究 　　随着科学技术的发展，科学家对S型细菌的DNA将R型菌转化为S型细菌的大致过程（图2）有了进一步的了解。研究表明少数R型活菌会处于感受态，膜表面会出现多种负责DNA的结合、切割及加工等的蛋白质，其中细菌自溶素等蛋白质能使细菌细胞壁部分溶解，暴露出细胞膜上的DNA结合蛋白和核酸酶等。被加热杀死的S型肺炎双球菌可释放出DNA片段，这些DNA片段遇到感受态的R型菌时，就会与细胞膜表面的DNA结合蛋白结合，激活邻近的核酸酶，其中一条链降解，另一条链则被吸收到受体菌内。进入受体细胞的单链DNA与相关蛋白质结合，形成有效保护单链DNA的复合物，并将其引至受体菌DNA处。供体单链DNA片段在另一些蛋白质参与下与受体菌的