2013年高考一轮复习生物课件-从杂交育种到基因工程.ppt

* 一、操作工具 1．基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶) (1)分布：主要在微生物体内。 (2)特性：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。 基因工程的操作工具及基本步骤 * (3)实例：EcoR Ⅰ限制酶能专一识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。 (4)切割结果：产生两个带有黏性末端的DNA片段。 (5)作用：基因工程中重要的切割工具。在微生物体内能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。 * 2．基因的“针线”——DNA连接酶 (1)催化对象：两个具有相同黏性末端的DNA片段。 (2)催化位置：脱氧核糖与磷酸之间的缺口。 (3)催化结果：形成重组DNA。 3．常用的运载体——质粒 (1)本质：小型环状DNA分子 * 二、操作步骤 * 提醒　①微生物常被用做受体细胞的原因是其具有繁殖快、代谢快、目的基因产物多的特点。 ②动物受体细胞一般选用受精卵，植物受体细胞可以是体细胞，但需与植物组织培养技术相结合。 * ★★★　本考点必修内容侧重转基因技术的基本操作、工具及安全性，深入考查基因工程的原理、过程及其应用则是选修三的高考要求。从历年高考命题来看，全国卷及各省市卷都有具体要求和较固定的命题模式(有的为必考，有的为选考)。复习时应按本省市具体高考要求有的放矢的进行复习和训练！ * 【典例2】?(2010·全国Ⅱ，5)下列叙述符合基因工程概念的是 (　　) A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 * 解析　基因工程是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。所以B为基因工程，而A为动物细胞工程，C为诱变育种，D无人为因素不属于基因工程。 答案　B * 【典例3】?(2008·江苏生物，32)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。 图1　转基因操作流程图 * 图2　引物对与模板结合示意图 * 引物对A P1　AACTGAAATGTAGCTATC P2　TTAAGTCCATTACTCTAG 引物对B S1　GTCCGACTAGTGGCTGTG S2　AGCTGGCGTTTAGCCTCG 表1　引物对序列表 限制酶 Alu Ⅰ EcoR Ⅰ Pst Ⅰ Sma Ⅰ 切割 位点 AG↓CT TC↑GA G↓AATTC CTTAA↑G CTGCA↓G G↑ACGTC CCC↓GGG GGG↑CCC 表2　几种限制酶识别序列及切割位点表 * 请根据以上图表回答下列问题。 (1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是________。 (2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？________。 * (3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？________。 (4)为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为________。 (5)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。 ①采用EcoR Ⅰ和Pst Ⅰ酶切，得到________种DNA片段。 ②采用EcoR Ⅰ和Sma Ⅰ酶切得到________种DNA片段。 * 解析　(1)PCR技术扩增DNA时，首先要在80～100 ℃范围内使DNA解螺旋。高温解决了打开DNA双链问题。但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。20世纪80年代，科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的Taq DNA聚合酶，使体外DNA扩增成为现实。(2)碱基A与T之间通过两个氢键相连配对，碱基C与G之间通过3个氢键相连配对，DNA分子中碱基C与G的比例决定了DNA分子的耐高温的程度。引物对B中C与G的比例明显高于引物对A，因此， 引物对B可采用较高的退火温度。(3)DNA连接酶的作用部位是磷酸基团与五碳糖之间的磷酸二酯键，对所连接的DNA两端碱基序列没有专一性要求。(4)将外源基因导入不同受体细胞时，所用的 * 方法是不同的。对