第六章节微生物的生长繁殖及其控制.doc

幻灯片1 第六章 微生物的生长繁殖 及其控制 幻灯片2 第一节 细菌的生长 一、相关概念及特点 生物个体细胞物质有规律地、不可逆增加，导致个体体积扩大的生物学过程。 生长： 繁殖： 生物个体生长到一定阶段，通过 特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。 幻灯片3 生长是一个逐步发生的量变过程， 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。 在高等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是在单 细胞的生物里，由于细胞小，这两个过程是紧密联系又很难划 分的过程。 幻灯片4 一个微生物细胞 合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。 如果同化作用的速度超过了异化作用 个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加 如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加。 群体内各个个体的进一步生长 群体的生长 幻灯片5 微生物生长: 在一定时间和条件下细胞数量的增加（微生物群体生长） 在微生物学中提到的“生长”，一般均指群体生长，这一点与 研究大生物时有所不同。 个体生长 → 个体繁殖 → 群体生长 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖 幻灯片6 微生物生长： 单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化 个体计数 群体重量测定 群体生理指标测定 微生物生长的测定： 评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响； 评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果； 客观地反映微生物生长的规律； 幻灯片7 二、以数量变化对微生物生长情况进行测定（P151） 1、培养平板计数法 通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌） 2、膜过滤培养法 当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形 成的菌落进行统计。 幻灯片8 3、液体稀释法（ The most probable number method ） 主要适用于只能进行液体培养的微生物，或采用液体鉴别培养基进行直接鉴定并计数的微生物。 对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度 平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统 计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算 出样品中的微生物数目。 幻灯片9 4、显微镜直接计数法 1）常规方法： 采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接计数（计算一定容积里样品中微生物的数量）。 缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察； 幻灯片10 显微镜测数法 幻灯片11 4、显微镜直接计数法 2）其它方法： 比例计数： 将已知颗粒浓度的样品（例如血液）与待测细菌细胞浓度的样品混匀 后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。 过滤计数： 当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品 通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色，并经处理使膜透明，再在显 微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数； 活菌计数： 采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数 幻灯片12 三、以生物量为指标测定微生物的生长 1、比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度(optical density, 即O.D.)表示菌量。 实验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内，否则不准确。 幻灯片13 幻灯片14 幻灯片15 幻灯片16 幻灯片17 2、重量法 以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量； 通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量； 测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法 幻灯片18 幻灯片19 幻灯片20 3、 生理指标法 微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。 样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量 热计等设备来测定相应的指标。 常用于对微生物的快速鉴定与检测 幻灯片21 第二节 细菌的群体生长繁殖 幻灯片22 微生物的特点： 个体微小 肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个 单个的微生物组成的群体。 微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。 对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础 幻灯片23 一、分批培养 1 、分批培养的概念 采用完全封闭的容器，一次接种，静置培养。（不更换培养基的培养方法） 特点：固定的营养物质 结果：细菌在一个容积有限的环境中不可能无限制地高速生长。分批培养中细菌的生长在短期内表现明显的规律性------