北京市售食品中多溴联苯醚PBDEs污染研究预处理方法的确定.docVIP

北京市售食品中多溴联苯醚PBDEs污染研究预处理方法的确定 　　【摘 要】多溴联苯醚（PBDEs）是我国广泛使用的溴代阻燃剂，因其高度的亲脂疏水性、难降解性和生化毒性而受到越来越多的关注。有研究指出，饮食摄入是人体摄入多溴联苯醚，尤其是低溴代联苯醚的最主要途径。因此，调查市售食品中PBDEs污染水平及分布特征同时评估居民由食物暴露PBDEs所带来的健康风险有着非常现实的意义。本文主要对该研究的预处理方法进行初步确定。 　　【关键词】多溴联苯醚（PBDEs）；市售食品；预处理方法 　　多溴联苯醚（Polybrominated Diphenyl Ethers，PBDEs ）属于溴系阻燃剂（brominated flame retardants），是一系列含溴原子的芳香族化合物，化学通式是C12H（1-9）Br（1-10），其结构式如图1.1所示。室温下，PBDEs亲脂疏水性强，易吸附于如土壤、沉积物和气体颗粒物等固体物质和蓄积于生物体内的脂肪中。同时PBDEs具有相当稳定的化学结构，在环境中难于降解，能持久存在，加之其具有亲脂性的特点，易于产生生物富集，并沿食物链逐级放大。 　　PBDEs同系物众多，且大部分以较低浓度存在于环境介质中，这增加了此类物质检测的复杂性和难度。相对于水、空气等环境样品，更为复杂的基质及更低的PBEDs含量导致食品中PBDEs的检测、分析更加复杂。为保证结果的准确性和可靠性，就需要很严格的前处理技术、特异性的分离技术及高灵敏的分析技术[1]。 　　本研究的样品前处理及仪器分析[2-15]工作均在中国科学院生态环境研究中心完成。 　　实验中所用的主要试剂为：无水甲醇分析纯、丙酮分析纯；二氯甲烷DCM农残级、石油醚农残级、正已烷Hexane农残级、丙酮农残级；二氯甲烷分析纯；无水硫酸钠优级纯、浓硫酸优级纯、氢氧化钠硝优级纯、酸银硅胶（0.063-0.100mm）。 　　1.样品的采集 　　在北京市大中型超市和农贸市场上随机采集市售的居民日常食用的8类样品食品，具体包括叶表类13种：叶菜类10种（菠菜、大白菜、小白菜、韭菜、生菜、油菜、芹菜、香菜、茴香、番杏叶），果菜类3种（黄瓜、青椒、尖椒）；根茎类3种（土豆、胡萝卜、红薯）；蛋类3种（鸡蛋、卤鸡蛋、咸鸭蛋）；肉类6种（猪瘦肉、猪肥肉、牛瘦肉、牛肥肉、鸡肉、羊肉）；水生动物类2种（鱼、虾）；谷物类2种（大米和小米）及奶粉共计30种样品 。采集当天运回实验室，洁净铝箔纸包裹后于-20℃冰箱中保存备用。 　　2.实验用品的准备 　　实验中用到的所有玻璃仪器都经过了严格的处理，以尽量消除可能的污染。首先，肥皂水浸泡过夜，随后用干净的毛刷刷洗，用清水冲洗十次以上后，倒置晾干或用电热鼓风干燥箱70℃下烘干后，放入马弗炉内在450℃下灼烧2小时以上，待其冷却后用少量二氯甲烷冲洗，放入通风橱内备用。 　　3.硅胶的制备 　　硅胶活化：将购买的硅胶用分析纯的1000mL的无水甲醇和1000mL的二氯甲烷冲洗。然后经高纯氮气吹干后，放在干净的托盘内在通风橱内过夜，待有机试剂挥发完全后将其倒入蒸发皿中，置放于马弗炉中550℃下灼烧6小时，温度降至100-200℃后将活性硅胶取出并置于干燥箱中2-3天，平衡备用。 　　硫酸硅胶柱塞好玻璃丝棉后由下至上装填 2.0g 硝酸银硅胶，1.0g活性硅胶，3.0g 氢氧化钠硅胶，1.0g 活性硅胶，4.0g 44%硫酸硅胶，4.0g 22%硫酸硅胶，1.0g活性硅胶及5.0g 无水硫酸钠，装柱过程中需确保每一层剖面平整而紧实，其装填顺序如图 3.1所示。 　　1.2硅胶柱装填顺序图 　　4.样品中目标物的提取 　　样本冷冻干燥48小时左右，取冻干的食物样品0.5g左右，放入研钵中，加入适量的无水硫酸钠，研磨、混匀。使用微量进样器滴加1uL13C标记的PBDEs标准样品（内有BDE-47、BDE-99 、BDE-183和 BDE-209，含量均为1ug/mL）。量筒量取40mL正己烷和二氯甲烷的混合溶液（体积比为1：1）倒入离心杯中，放入超声细胞破碎机内超声3分钟，随后置于低速离心机中离心沉淀。上清液倒入鸡心瓶中，重复以上操作两次，将全部提取液倒入鸡心瓶中，旋转蒸发，将提取液浓缩至2～5mL，备用。应用重量差法测样品脂肪含量。 　　硅胶装填完毕后，用100mL的正己烷和二氯甲烷（体积比为1：1）预淋洗硅胶柱后再将浓缩后的提取液滴加到柱内，用1：1的正己烷和二氯甲烷冲洗鸡心瓶内壁三次，将洗液全部滴加到硅胶柱内，待前次滴加的液体完全流下后再次滴加。最后用100mL的正己烷和二氯甲烷（体积比1：1）淋洗硅胶柱，接取全部试剂。 　　用旋转蒸发仪将淋洗液浓缩至1～2mL，将浓缩液转移至KD管中，正己烷冲洗鸡心瓶三次，