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念珠藻生长特性研究 　　摘 要：研究了念珠藻的生长周期、固氮特性、生长条件等生长特性。得出本实验念珠藻可以固氮；磷能有效制约其生长；需要长时间的光照等结果。 　　关键词：念珠藻；生长特性；异形胞 　　中图分类号：Q949．2 　　文献标识码：A 　　文章编号：1007-7847(2006)01-0055-06 　　念珠藻是淡水中常见的一类丝状固氮蓝藻， 它广泛分布于全球7大洲，从陆地到淡水生态 系统，从热带土壤到极地冰原，即使在极度干旱和 高紫外线照射的地区，念珠藻的一些种类，如 Nostoc flagelliforme(发状念珠藻，俗称发菜)也有 分布。念珠藻隶属于蓝藻门蓝藻纲段殖体目念 珠藻科。念珠藻的一些种在民间被作为野生蔬 菜食用。已有数千年的历史。念珠藻含有丰富 的营养价值，据分析，念珠藻体内含有丰富的果 胶、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素及藻胆素和藻蓝 蛋白(phycoyamin)。其中普通念珠藻(Nostoc commune)氨基酸的组成不亚于动物蛋白，铁的含 量每100g高达5746．39mg，对贫血患者是很好 的补铁食物，钙含量占干重的2，91％，是一种具 有潜在开发价值的补钙食品源之一。念珠藻类还 具有很大的医疗和保健作用，在《本草纲目》《本草 纲目拾遗》中有关于普通念珠藻的药用价值的记 载。近些年人们从念珠藻的甲醇提取物中，分 离到了一种有抗真菌活性的氨基酸衍生物一环肽 Nostofungicidine，发现其结构中包含新奇的β氨 基酸残基和3―氨基-6-羟基-硬脂酸残基。在 微藻产业方兴未艾的今天，念珠藻的营养价值及 其应用潜力再度引起研究者们的浓厚兴趣，念珠 藻的食用、药用及工业价值显示出良好的产业前 景。然而随着工业化进程的进一步深化，水体富营 养化程度也随之增加，目前已有一些关于饮用水 中蓝藻产生危害人类身体健康的报道，念珠藻也 位列其中。但是目前很少见到关于念珠藻生长特 性的报道，缺少对念珠藻进行深入研究的资料，鉴 于此，本实验室对从水源水中分离的念珠藻进行 了一系列生长特性的研究，以便于对其营养和安 全作进一步的研究和评价。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1．1 供试藻种 　　河北大学生命科学学院普通微生物学实验室 念珠藻(Nostoc，sp)的纯化藻种。 　　 　　1．2 供试培养基 　　1)HGZ培养基：为本实验基础培养基．配置 方法如下(单位mg／L)：NAN03(1-500)，K2HP04 (39)，MgS04?H20(75)，NaC03(20)，CaCl2(27)， Na2Si03?9H20(58)，EDTA(1)，柠檬酸(6)，柠檬 酸铁(6)，A5(1)。 　　2)固体培养基：在基础培养基的基础上按 1．5％加入琼脂； 　　3)无氮培养基：在基础培养基的基础上去除 氮源NAN03； 　　4)无磷培养墓：在基础培养基的基础上去除 磷源K2HP03； 　　5)贫营养固体培养基：将2)的浓度降低一半， 　　 　　1．3 培养条件 　　温度(28±1)℃，光照强度1 5001x左右，于 光照培养箱内24h持续光照培养， 　　 　　1，4 实验方法 　　1．4．1 藻体生长状态观察 　　在无菌环境下300 mL的三角瓶中装入150 mLHGZ基础培养基，取新鲜绿色的藻悬液按l％ 量接种，置于光照培养箱培养，温度(281)℃， 光照强度15001x左右，24h持续光照。每隔3d 在显微镜下观察藻培养液一次，记录其生长特征。 　　 　　1．4．2 生长曲线的绘制 　　在上述培养状态下每天将藻培养液在4 500 r／min下端,20rain，去上清，称取藻体湿重，以 生长时间为横坐标，藻体湿重为纵坐标，绘制生长 曲线。 　　 　　1．4．3 考察念珠藻对氮磷的利用 　　通过在5)贫营养培养基中将念珠藻培养，以 造成念珠藻的饥饿生长状态，收获，制成藻悬液， 将藻悬液按1％量分别接种于基础培养基、无氮、 无磷3种培养基中，培养基装量为每50mL三角 瓶装液20mL。光照培养箱中培养，从三角瓶中 出现足够明显的藻团开始每隔一天观察并离心称 湿重，直至藻体出现大量明显的死亡，通过对比 观察，考察念珠藻对氮磷的吸收。 　　 　　1．4．4 考察培养基不同状态对念珠藻生长的 影响 　　 　　1，4．4，1 藻悬液的制备 　　取新鲜的念珠藻，离心，去上清，称重，加入适 量蒸馏水配成一定浓度的藻悬液。 　　 　　1．4．4．2 接种 　　1)藻种接种于固体培养基上 　　超净工作台里在琼脂未凝固时用量筒准确量 取20mL培养基，倒平板，待平板凝固后用微量取 样器取0.2mL藻悬液接种于固体平板上，用三角 刮涂布，光照培养箱内培养。