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现代微生物发酵及技术教程 4.微生物发酵工程概述 发酵工程是利用微生物细胞的代谢过程生产有用的各种产物的过程，它由三个核心部分组成：一、生产特定产物的微生物菌种的选育；二、利用适当的设备和技术为菌种提供最佳条件，充分发挥菌种的生产能力；三、将发酵产生的产物经分离、纯化，以提高收率获得质量合格的产品。 微生物发酵工业以发酵为主，发酵水平的好坏是整个生产的关键，但后处理在发酵生产中也占有重要的地位。完整的微生物发酵工程应该包括从原料到获得终产品的过程，即菌种是基础，发酵是关键，分离纯化是保障。 4.1 微生物发酵的类型 按照微生物对氧气的要求、发酵采用的方式、发酵产物的特性，将发酵分为不同的类型： 4.1.1 按照微生物对氧气的要求分类 1、好氧发酵：指发酵产物形成时需要充足的氧气。如柠檬酸发酵、草酸发酵、谷氨酸发酵以及各种抗生素发酵等。 2、厌氧发酵：指发酵时不需要提供氧气，如丙酮-丁醇发酵、乳酸发酵、丙酸发酵、丁酸发酵等。 3、兼性厌氧发酵：产生酒精的酵母菌是一种兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行酒精发酵，积累酒精，在大量通气条件下则进行好氧发酵，产生大量酵母细胞。 4.1.2 按微生物发酵采用的培养基状态分类 1、固体发酵 固态发酵是指没有或几乎没有自由水存在下，在有一定湿度下的固态基质中，用一种或多种微生物的一个生物反应过程。 固体发酵的优点： 操作简便、发酵过程容易控制、对无菌要求相对较低、不易发生大面积的污染； 基质含水量低，生物反应器的体积小； 发酵的副产物可以综合利用，不需废水处理； 供氧由气体扩散或间接通风完成，能耗低； 能在一定程度上解除产物抑制，可获得较高的次级代谢产物。 缺点： 厂房面积大； 生物反应器设计不够完善； 难以准确测定含水量、菌体量和二氧化碳生成量等发酵参数； 微生物生长速度缓慢，容易污染； 只适合用于耐低活性水的菌等的发酵。 2.液体发酵 液体发酵的方式： 1、将培养基放在瓷盘内，进行静止培养，称浅盘发酵（表面发酵）。该法存在不少的缺点，如劳动强度大，占地面积大，产量小，易染杂菌等，因此迅速被液体深层发酵所取代。 2、将培养液放入不锈钢制成的发酵罐，在罐内进行深层发酵。 液体深层发酵的优点： 1、液体为悬浮状态为许多微生物提供最适合生长环境，菌体生长快，发酵产率高，发酵周期短； 2、在液体中，菌体、底物、产物以及发酵产生的热量易于扩散，使发酵可在均质条件下进行，易于控制，便于扩大生产规模； 3、厂房面积小，生产效率高，易进行自动控制，产品质量稳定； 4、产品易于提取和精制。 但液体深层发酵消耗能源多，设备复杂，需要较大的投资，有废物排除等缺点。 4.1.3 发酵的一般工艺过程 微生物发酵产物虽然多种多样，发酵类型不一，但总体上的工艺流程是相似的，包括以下过程： 1、原料的处理和灭菌； 2、空气的净化除菌； 3、菌种的扩大培养； 4、发酵的条件控制； 5、产品的提取精制等阶段。 4.2 原料的选择及处理 培养基是微生物生长繁殖需要的营养环境。培养基成分包括碳源、氮源、无机盐、微量元素和水等。 4.2.1 选择合适的原料 标准： 1、原料中碳的可利用率高； 2、发酵率高，而且尽可能使发酵残余物少； 3、原料质量好，成分稳定，污染变质少，易灭菌； 4、廉价，来源方便，易于保藏。 4.2.2 淀粉水解糖的制备 淀粉是由葡萄糖组成的生物大分子，除少数霉菌可以直接利用淀粉外，目前大多数微生物都不能直接利用淀粉，如氨基酸产生菌、酒精酵母、抗生素产生菌等。因此在氨基酸、抗生素有机酸等的生产中，都要求先对淀粉或淀粉原料进行糖化，制成淀粉水解糖后使用。 将淀粉水解为葡萄糖的过程称为糖化，制得的糖溶液叫淀粉水解糖。 又称酸糖化法，它是以酸为催化剂在高温下将淀粉水解转化为葡萄糖的方法。 优点：生产方便，设备简单，水解时间短，设备生产能力大； 缺点：a反应在高温高压及酸条件下进行，对设备有耐腐蚀、耐高温和耐高压的要求； b发生副反应，葡萄糖损失，淀粉的转化率低； c对原料要求严格。 B、酶酸法：是先将淀粉乳用α-淀粉酶液化到一定程度，再用酸水解成葡萄糖的工艺。有些淀粉原料颗粒大小不一，如用酸法水解，则常使水解不均匀，出糖率低。生产中应用酶酸法，可采用粗淀粉为原料，粉料浓度较酸解法高，生产易控制，耗