冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对乳鼠脑的感染和定位.pdfVIP

生堡塞堕塑堕鏖煎垂鲎鍪查!!!壁生!旦筮丝鲞筮!塑垦!i!!竺』堡翌垦丛!!型!叁P巫!!!!Q：!吐丝：塑!：! ·85· ．论著 冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对 乳鼠脑的感染和定位 黄莹，龚锴，唐青 【摘要】 目的冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对乳鼠脑的感染和定位。方法 将本实 验室构建并拯救成功的人用狂犬病疫苗株重组病毒(CTN—GFP)脑内接种1日龄乳鼠和4周龄成年 鼠，待感染乳鼠发病后至濒死期，通过心内灌流方法固定并制作脑组织冰冻切片，观察重组病毒在感 染鼠的大脑海马组织中的绿色荧光蛋白的表达及分布。结果DAPI将所制作的冰冻切片中脑组织 内细胞的胞核染成蓝色，在共聚焦显微镜下观察到受感染乳鼠的腕组织海马回位置有大量绿色荧光 蛋白的表达。结论通过制作脑组织冰冻切片的方法可以清楚的观察到病毒的感染及其在海马回中 的位置，同时为追踪病毒在体内的移行过程提供了一种新方法。 【主题词】冷冻，超薄切片术；狂犬病病毒；动物替代试验 Virusdetectionandvirallocationinbraintissueof miceinfectedrecombinantrab