呋喃唑酮对雄性大鼠避育机理研究.docVIP

呋喃唑酮对雄性大鼠避育机理研究 　　【摘 要】 目的:研究呋喃唑酮对雄性大鼠睾丸细胞的药理作用。方法:按不同时间间隔,每日给大鼠灌喂20mg/ml呋喃唑酮,然后取大鼠睾丸进行病理细胞分析;及停药后大鼠睾丸细胞的恢复。结果:呋喃唑酮对睾丸细胞有特异性的损伤,停药一定时间细胞的功能恢复。结论:呋喃唑酮使用的剂量和时间有量效关系。 　　【关键词】 呋喃唑酮; 大鼠; 睾丸 　　 　　The Furazolidone evades to the male big mouse nurtures mechanism’s research 　　DONG Chun’e Jilin Province Population Life Science Research Institute, Jilin 130041, China 　　【Abstract】 Objectives: The purpose of study is that Furazolidone on male rat testis cells in pharmacology. Method: According to different time-gap, daily to rats fed 20mg/ml Furazolidone, then take the rat testis pathological cell analysis; And after the restoration of rat testicular cells. Results: Furazolidone to testicle cell has the specificity damage stops the medicine certain time cell’s function restoration. Conclusion: The use dosage and the time of Furazolidone have the quantity effect relations. 　　【Key words】 Furazolidong; Rat; Testes 　　 　　呋喃唑酮[nitrofurazolidone,NFZ,N-(5-nitro-2-furfuylidene)-3aminiooxazolin-2-one]属于硝基呋喃类化合物,是一种廉价的广谱抗生素[1],主要适用于治疗菌痢、腹泻[2]。已知呋喃唑酮对人体的毒副作用包括恶心、呕吐、厌食、周围神经炎等,以及使先天性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏者易出现溶血性贫血[3]。相对的,硝酸呋喃类抗生素中的其他成员如呋喃妥因、呋喃西林等对人体的毒副作用还要大于呋喃唑酮。为进一步探讨呋喃唑酮对细胞的毒副作用机制,我们拟定了呋喃唑酮对大鼠睾丸的作用机制的研究,现报告如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 材 料成年雄性Wistar大鼠购于吉林大学动物饲养室,呋喃唑酮标准品由药检所提供,其他试剂均为国产分析纯。 　　1.2 方 法成年雄性Wistar大鼠共22只,分6组,正常2只为对照组,余下20只每4只为1组,每只重约250g,常规喂养。将呋喃唑酮按20mg/ml用生理盐水溶解,其中20只按100mg/1g体重,每日灌喂1次。分别与开始用药后的12、24、48、72、96h随机将2只Wistar大鼠用乙醚麻醉后断头,每组剩余2只备用,低温无菌条件下分离睾丸组织,大鼠的左侧睾丸,经甲醛固定、石蜡包埋、切片,用于原位末端标记检测,右侧组织迅速剥离包膜及脂肪组织,用灭菌的100目铜网将曲细精管磨碎,加入1ml冷PBS,再用100目尼龙网制成单细胞悬液,用于梯度电泳鉴定。留下2只每日灌服生理盐水,并于96h后随用药Wistar大鼠一起麻醉后断头,取组织进行2种检测。见表1。 　　 　　1.3 梯状电泳鉴定 　　(1)细胞用冷PBS洗2次,每次于1000转/min离心5min;(2)每106个细胞中,加入20℃反应2h冷裂液(50mM Tris-HCl,pH 7.5,20mM EDTA,1%NP-40)轻轻震荡10s后,1600转/min,离心5min;(3)上清加入1%SDS,加入RnaseA至5μg/μl,56℃反应2h;(4)加入蛋白酶K至2.5μg/μl,37℃反应3h;(5)加入1/2体积的10M乙酸铵,2.5倍体积的预冷无水乙醇,室温放置10min;(6)10000转/min,4℃离心10min,用75%乙醇洗沉淀2次,空气干燥,重溶于20μl TE中;(7)取10μl电泳,电泳条件:0.5×TBE电泳缓冲液(45mM Tris-borate,2mM EDTA),室温、恒压50V电泳1.5h后,加入2μg/μl EB