基于DNA条形码及UFLC技术藏药翼首草相关性品质评价研究.docVIP

基于DNA条形码及UFLC技术藏药翼首草相关性品质评价研究 　　[摘要]该研究基于DNA条形码和UFLC技术从生物物种遗传和化学指纹图谱鉴别等方面进行藏药翼首草的品质评价研究。采用DNA条形码技术对翼首草进行品种鉴定；采用UFLC对翼首草地上地下部位进行指纹图谱研究，并运用SPSS、灰色关联度等分析软件进行数据分析；同时运用灰色关联度分析翼首草遗传信息与化学成分之间的相关性。结果表明DNA条形码技术可准确鉴定翼首草药材；UFLC指纹图谱分析发现藏药翼首草地上、地下不同药用部位的化学成分存在差异；通过遗传信息与化学相关性研究揭示了翼首草遗传基因可能对其所含药效成分环烯醚萜苷类次生代谢产物的产生有较大的影响。通过对藏药翼首草遗传和化学相关研究为其为其品质评价及资源保护提供新思路。 　　[关键词]藏药；翼首草；DNA条形码；UFLC；品质评价；遗传-化学；关联度分析 　　[Abstract]DNA barcoding technique in combination with UFLC analysis technology was used to evaluate the quality of Tibetan medicine Pterocephalus hookeri from species identification and chemical qualitative and other aspects.Hybrid identification was established by DNA barcoding； UFLC-PDA was adopted to analyse fingerprint of different parts of Pterocephali Herba， and SPSS and Grey relation software were used for data analysis. The result showed that DNA barcoding is an accurate and reliable method in origin identification of Pterocephalus hookeri. The compounds in overground is more than underground by analysis of the different part fingerprint by UFLC. The genetic gene may be involvedin the secondary metabolites of iridoid glycosides. Pertinence between gene and chemical component，as a new model established，could be suited for quality evaluation and resources protection. 　　[Key words]Tibetan medicine； Pterocephalus hookeri； DNA barcoding； UFLC； quality evaluation； genetic-chemical； relation 　　翼首草（藏文名“榜孜毒乌”），是一种常用藏药，收载于《中国药典》（2010年版一部）[1]及卫生部《藏药部颁标准》等标准中[2]，藏医院临床用药经验及通过对文献的查阅证实翼首草治疗类风湿性关节炎疗效显著[3-7]，现代药理学研究表明翼首草确有抗炎、止痛等功效[8-10]。翼首草临床需求量大，但其资源匮乏，早在公元2000年就被列入一级濒危藏药物种目录[11]。藏医古籍文献、藏医院及现代药材标准对翼首草药用部位的规定不统一，其全草、地上部分、地下部分均有入药。现行药典规定其药用部位为全草，若继续全草入药，将会对其资源造成严重破坏。 　　翼首草前期实验研究表明，其环烯醚萜苷及五环三萜皂苷为主要活性成分[12]。但目前的实验主要集中在翼首草的不同产地、不同用药部位中总皂苷的含量比较研究，以及对全草指纹图谱及含量测定的研究。未能整体性体现翼首草不同药用部位所含环烯醚萜苷类和五环三萜皂苷类成分情况。 　　本文就上述所存在的问题进行了实验研究，以ITS2 序列作为DNA 条形码鉴定序列，建立翼首草药材的DNA条形码鉴别体系，保证了翼首草药材的“真”。基于前期研究基础，采用UFLC-PDA 方法比较了翼首草不同用药部位指纹图谱的差别，并运用灰色关联度等分析软件对地上、地下部分所测结果进行数据分析，研究其遗传―化学相关性。通过研究翼首草的品种鉴定，不同部位化学成分差异，遗传信息与化学成