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多胺对细菌生物膜作用多样性 　　[摘要]生物膜的形成和分散受多种因素调控，阻断生物膜的形成及促进生物膜的解离分散是目前的研究热点和前沿方向。近年来的研究表明，多胺这一在原核和真核生物中广泛存在的物质同样在细菌生物膜的形成和分散过程中起到了非常重要的作用，本文就多胺对细菌生物膜相关作用的研究作一综述。 　　[关键词]细菌生物膜；生物膜形成；生物膜分散；多胺 　　[中图分类号]R 780.2 [文献标志码]A [doi]10.7518/gjkg.2015.03.027 　　多胺是一类具有两个以上氨基的脂肪族化合物，其中腐胺、亚精胺和精胺三种成分普遍存在于真核生物与原核生物细胞代谢过程中，这些多胺类小分子物质在生理环境下带有正电荷，可以离子键和氢键的形式与核酸、蛋白质以及含有负电荷基团的磷脂等物质结合。由于多胺化学结构的某些部分具有脂肪族特性，因而多胺可控制细胞的生长、增殖、分裂和分化以及膜的稳定性等。多胺在胞内通常以多胺-RNA复合物的形式存在，其质量的动态平衡受到严格的调控，绝大多数细菌利用合成和转运来满足对多胺的需求。 　　细菌通过生物膜生存于较为恶劣的环境中，藏匿于胞外多聚物和环境脱氧核糖核酸（environmental DNA，eDNA）为主要骨架的基质网中，较之单细胞浮游状态的细菌，具有更强的耐药性及抵抗宿主免疫攻击的能力。生物膜形成包括细菌黏附、生物膜发展成熟和生物膜分散三个阶段，多种因子及信号系统参与了生物膜发展的整个过程。目前不同的研究团队针对不同的细菌生物膜所作的研究皆提示，多胺是一种生物膜发展过程中的重要物质，其作用效果多种多样，非常见多胺也受到了更多的关注。 　　1.革兰阴性菌中的多胺 　　1.1大肠埃希菌 　　早在1996年，Sugiyama等就发现膜结合蛋白PotD可结合亚精胺发挥一系列调控细菌各项生理功能的作用。PotD转导系统在其余细菌中也存在。Zhang等发现，PotD蛋白通过结合亚精胺刺激大肠埃希菌生物膜的形成。Sakamoto等还发现，双组分信号转导系统的反应调节子UvrY、CpxR蛋白以及核糖体释放因子（ribosome releasing factor，RRF）三种蛋白质是生物膜形成的关键蛋白，其基因在转录水平受到多胺的调节。Kolodkin-Gal等用浓度为100、200、500 umol?L的亚精胺、精胺、去甲亚精胺和去甲精胺作用于大肠埃希菌菌株MC4100生物膜形成过程，与对照组相比较，亚精胺和精胺都能促进大肠埃希菌生物膜形成，精胺在500 umol?L时的促进作用更加明显，而高浓度的去甲亚精胺和去甲精胺则明显抑制大肠埃希菌的生物膜形成。 　　1.2霍乱弧菌 　　霍乱弧菌是导致肠道烈性传染病的重要病菌，关于霍乱弧菌中多胺的合成和功能已较为清楚。如前所述，广泛存在于细菌中发挥重要生理功能的多胺包括了亚精胺，而在弧菌属中去甲亚精胺取代了亚精胺的位置，在弧菌中发挥着类似的重要的生理功能。在霍乱弧菌中，去甲亚精胺和膜结合蛋白NspS复合物与细胞周质蛋白MbaA结合，通过MbaA-Nsps信号系统依赖的方式促进生物膜形成；而亚精胺则起到了相反的作用，弧菌中的potD1为大肠埃希菌potD的同源基因，亚精胺可以结合PofD1蛋白或者同样通过MbaA-Nsps信号系统抑制霍乱弧菌生物膜的形成，缺失了potD1基因的菌株生物膜大量增长。有趣的是，去甲亚精胺与其合成酶NspC对生物膜形成的影响为非依赖性并且有所区别，NspC蛋白过表达，但却不影响去甲亚精胺的浓度，同样可引起胞外多糖vps基因的过表达，从而促进霍乱弧菌生物膜的形成。 　　1.3鼠疫耶尔森菌 　　鼠疫耶尔森菌为革兰阴性短粗杆菌，也是烈性传染病的重要病原菌。在该菌的生物膜形成过程中，腐胺作用最大。鼠疫耶尔森菌的speA和speC基因编码多胺的合成酶。缺失speA基因，腐胺合成减少95%；缺失speC基因，腐胺合成减少55%；两基因均缺失则腐胺减少99%，菌的生长率下降65%。即生物膜的量与腐胺的浓度呈正相关。speA或speC单一基因缺失，亚精胺浓度没有变化；而在双基因缺失时，亚精胺浓度则突然降至不能检测的水平；在多种多胺物质中，只有添加外源性的腐胺对双基因缺陷株的生物膜缺陷有修补效果，即腐胺是鼠疫耶尔森菌生物膜形成的重要物质。Wortham等发现：鼠疫耶尔森菌分别有HmsH、F、R、S、T、P六个影响生物膜形成的蛋白质，多胺是维持这些蛋白质水平所必需的物质；在多胺缺乏的情况下，HmsR、S、T蛋白的质量分数分别减少了93%、43%、90%；speA和speC双基因缺陷株在补充了外源性的腐胺后，可恢复HmsR、S、T蛋白至正常水平，从而恢复生物膜的正常形态。 　　2.革兰阳性菌中的多胺 　　2.1枯草芽孢杆菌