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基于小叶嫁接法草莓病毒症状鉴定 　　摘 要：为了分析几种主要病毒病在指示植物上的症状，利用指示植物UC10、UC5通过草莓小叶嫁接法，检测草莓病毒症状，特别是单一病毒感染指示植物时的症状。通过设置多重处理、对照，比较各处理间、处理内症状差异，得出病毒在各种指示植物上的症状特点。检测结果表明：首先，此次试验所检测的病毒为我国主要草莓病毒，它们是草莓轻型黄边病毒、草莓斑驳病毒、草莓镶脉病毒；其次，在嫁接前准备方面总结出一套培育壮苗的方法，可显著提高叶柄粗度34.76%，提高叶柄长度47.83%，为提高嫁接成活率提供了很大的帮助；再次，在嫁接过程中应用科学高效的嫁接方法，达到了嫁接成活率100%，为后面的症状鉴定提供了便利；最后，根据观察的症状，推测草莓轻型黄边病毒与草莓镶脉病毒之间的相互影响关系。 　　关键词：草莓；病毒；小叶嫁接；指示植物 　　我国草莓产区普遍存在的病毒有4种，即草莓斑驳病毒（SMoV）、草莓皱缩病毒（SCrV）、草莓轻型黄边病毒（SMYEV）和草莓镶脉病毒（SVBV）。 草莓感染病毒后，特别是感染单种病毒，大多症状不显著或难以看出什么症状，称为隐症。 草莓病毒侵染草莓后，主要表现为叶片失绿、畸形、生长量减少、植株矮化、产量下降、品质变劣等。目前，我国草莓产区中这4种病毒的总侵染株率达80.2%，其中单种病毒侵染株率为41.6%，两种或两种以上病毒复合侵染株率为38.6%。单―病毒感染植株可使草莓减产20%～30%，两种病毒复合感染减产可达50%，栽培年限越长，感染的病毒种类越多，发病受害程度越重。 　　目前对草莓病毒的检测主要有4条途径，即对栽培植株的外观性状直接观察分析判断；利用电子显微镜直接观测植株组织中的病毒；利用医学上抗血清鉴定法检测草莓病毒；在特定的指示植株上接种鉴定。由于病毒侵染栽培植株表现的症状在不同的生育阶段和季节中不甚一致、明显，用直接观察的办法难以明确判定侵染病毒的种类，电子显微镜法和抗血清检测法操作复杂、要求精密、适用面太窄，而指示植物接种检测法简单直接又方便实用。 　　自从哈雷斯（1942）提出林丛草莓（Fragaria Vesca）可以作为草莓病毒检测指示植物以来，已确定林丛草莓中的UC4、UC5、UC6以及深红草莓（Fragaria Virginiana）中的UC10、UC11和UC12共6个单系作为草莓主要病毒检测的指示植物，并在国际上通用。为了提高检测的准确性，有时又在草莓病毒检测指示植物中接种了特定的潜隐型病毒，使有的病毒病症状易于显现。较常用的是Frazier（1974）改进的小叶嫁接法，检测并保存病毒。 　　本试验通过小叶嫁接法鉴定分析几种主要病毒病在指示植物上的症状。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　试验所需材料有指示植物UC10、UC5，生产用的已染病毒草莓苗，以及嫁接用的刀片、70%浓度乙醇、捆绑用塑料条（厚0.08毫米，宽9毫米，长20厘米）、塑料袋（膜）、游标卡尺、数码相机等。因组织培养的UC5茎尖取样不同，株系间有差异，所以UC5分成3个株系，用UC5（1）、UC5（2）、UC5（3）表示。 　　1.2 嫁接方法 　　所有嫁接试验均采用劈接法，具体步骤如下。 　　1.2.1 准备嫁接材料 选择嫁接用的接穗与指示植物。准备好嫁接刀片、捆绑用的塑料条。接穗与指示植物尽量粗大，便于操作，其次注意叶龄，指示植物叶龄以叶片充分展开的新功能叶为宜，因为要保证它在嫁接后可生长期足够长，便于满足观察与鉴定的需要。而相对于接穗的叶龄，最好与指示植物叶龄相匹配。如果条件有限，至少选择在20天内不会自然衰亡的叶片。然后留叶柄3厘米以上采摘接穗，准备嫁接。 　　1.2.2 切叶 用刀片沿指示植物中间叶片根部两侧斜向内切，两刀汇于一点，刀口呈“V”字型，刀深小于1毫米，取下中间叶片。然后切接穗，在接穗中间复叶根部沿斜向外方向削去两侧叶片，刀深至少1毫米。然后再沿两侧切口向下削成契型。两面尽量作到一刀成型、削面平滑。楔型面长在0.8～1.5厘米范围内，过短影响嫁接成活率；过长捆绑费时，影响工作效率，1.2厘米为最适长度。再于指示植物“V”型切口底端处，向下切至与接穗等长深度，使指示植物切口上端与接穗切口上端相平，或略大于。 　　1.2.3 捆绑 以事先准备好的塑料条，从下端开始自下而上捆绑。要求每绑一圈前都加力使塑料条拉伸变长，然后再绕圈，随着捆绑圈数的增加，可以借助塑料条回缩力量使伤口接合处紧密贴合，有利于成活。绑到上端切口时，注意绑紧，使切口不直接暴露于空气中，防止失水。然后向下回绑至底端，在底端打结。最后可以不必涂抹凡士林油，即达到保湿效果，因为紧绑的塑料条层层紧贴，完全可以防止透气、失水，而且节省材料和时间，提高工作效率。 　　1.2.4