基于聚对苯二甲酸乙二醇酯薄膜石墨烯金纳米粒子葡萄糖氧化酶柔性电极制备及检测葡萄糖.docVIP

基于聚对苯二甲酸乙二醇酯薄膜石墨烯金纳米粒子葡萄糖氧化酶柔性电极制备及检测葡萄糖 　　摘 要 采用化学气相沉积法生长多晶石墨烯（Graphene， G），转移至聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）薄膜表面，通过控制金溶胶蒸发速率，在多晶石墨烯表面组装均匀分布的亚单层金纳米粒子（AuNPs）；然后修饰巯基乙酸，通过共价交联反应将葡萄糖氧化酶固定于AuNPs表面，构建基于PET膜的石墨烯/金纳米粒子/葡萄糖氧化酶（G/AuNPs/GOD）柔性电极。此电极在工作电位0.6 V（vs.SCE电极）、pH 7.0磷酸盐缓冲溶液、室温25℃条件下，差分脉冲伏安法响应电流与被测葡萄糖浓度在0.05～10.55 mmol/L范围内呈线性关系，线性方程为I（108A）=0.2629 C（mmol/L）+1.4149，线性相关系数 r=0.9955，检出限1 μmol/L （3σ）。 G/AuNPs/GOD柔性电极的制备可为特定环境和可穿戴设备的葡萄糖检测提供了新的途径和方法，拓展了葡萄糖检测的应用范围。 　　关键词 葡萄糖； 柔性电极； 葡萄糖氧化酶； 石墨烯； 金纳米粒子 　　1 引 言 　　葡萄糖的检测在医学、工业生产、食品、环境等领域均有广泛的应用 [1]。其中，基于葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase， GOD）的电化学检测方法是应用最广泛的方法之一，例如长期使用的生化分析仪或植入式的血糖传感器等设备均采用了此方法。葡萄糖氧化酶电极主要利用酶对底物的专一选择性和催化反应的高效性，可在复杂样品（如血液）中直接、高灵敏地检测葡萄糖的催化氧化产物，而不易受其它成分干扰；同时具有较高的稳定性，可多次或长期使用。与所有的生物酶电极类似，葡萄糖氧化酶电极制备的关键是如何将酶长期稳定固定在电极表面，保持酶的活性。目前已经发展了许多酶的固定方法，如电化学法[2，3]、层层自组装法[4]，共价交联法[5]、溶胶-凝胶法[6～8]等。新的纳米材料的出现，如金纳米粒子[9]、碳纳米管[10]、石墨烯[11～13]、石墨烯/金纳米粒子复合物[14～16]等，不但具有高的比表面以固定更多的酶，还可以增强电子传递的能力。在已报道的石墨烯相关研究中，主要使用其微纳米颗粒或悬浮液形式进行加工，如Hui等[11]将石墨烯粉末悬浮液滴涂在金盘电极上，滴加葡萄糖氧化酶和Nafion溶液成膜，制备葡萄糖检测电极；Wang等[14]在玻碳电极上滴加石墨烯悬浮液，干燥后再浸入氯金酸溶液，利用电化学法共合成石墨烯/金纳米粒子复合物，再滴加葡萄糖氧化酶形成葡萄糖检测电极。这些研究充分利用了石墨烯纳米结构（片或卷）大的比表面积和良好的电子传递能力，显著改善了葡萄糖酶电极的性能。但石墨烯作为可大面积制备的二维纳米材料，在柔性电极和可穿戴装备方面的应用仍较少。 　　本研究将化学气相沉积法生长于铜箔上的多晶石墨烯转移至聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）薄膜表面，通过控制金溶胶蒸发速率，在多晶石墨烯表面组装均匀分布的亚单层金纳米粒子，修饰巯基乙酸，然后将葡萄糖氧化酶共价固定于金粒子表面，构建了基于PET薄膜的石墨烯/金纳米粒子/葡萄糖氧化酶G/AuNPs/GOD柔性电极，利用电镜、傅立叶变换红外（FTIR）光谱、电子能谱对电极进行表征，考察了柔性电极对葡萄糖检测的线性范围、检出限、稳定性、重复性、选择性等性能。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　Hitachi S-4800扫描电子显微镜（日本日立公司）；CHI 760 D电化学工作站（上海辰华仪器公司）；Rigaku Ultima IV型 X-射线衍射仪（日本理学公司）；NicoletAvatar 330傅里叶变换红外光谱仪 （美国热电公司）；Mill-Q超纯水机（美国Millipore公司）。 　　葡萄糖氧化酶（GOD， 100～250 U/mg，厦门慧嘉生物科技有限公司）；氯金酸（HAuCl4?4H2O）、H2O2（30%）；、柠檬酸钠（C6H5Na3O7?2H2O）；Na2HPO4、NaH2PO4（国药集团化学试剂有限公司）；所用试剂均为分析纯；实验用水均为超纯水（18.2 MΩ?cm）。 　　2.2 G/AuNPs电极的制备 　　多晶石墨烯/PET薄膜电极由厦门大学物理系蔡伟伟课题组提供，制备方法为在铜箔上采用化学气相沉积法生长石墨烯，然后通过PMMA转移至PET薄膜表面制备[17]。 　　Au纳米粒子（AuNPs）按照文献[8]方法用柠檬酸还原氯金酸制备合成：在沸腾条件下，向200 mL 0.01% （m/V） HAuCl4溶液中快速加入1.4 mL 1% （m/V）柠檬酸三钠，反应30 min，得到55 nm AuNPs。取100 mL AuNPs原液， 6000 r/min离心，移去上层清液，