复方马齿苋液对小鼠实验性接触性皮炎疗效及作用机理研究.docVIP

复方马齿苋液对小鼠实验性接触性皮炎疗效及作用机理研究 　　【摘要】 目的 探讨复方马齿苋液对治疗湿疹皮炎疗效及对迟发型超敏反应作用机理。方法 用2，4-二硝氯苯(2，4-DNCB)对ＩＣＲ小鼠皮肤致敏和诱发，制成实验性接触性皮炎模型。以中药制剂复方马齿苋液作为治疗组，以氢化可的松琥珀酸钠为阳性对照组，以生理盐水为阴性对照组。对小鼠耳壳皮损严重度、耳壳增重值、耳壳皮损炎症细胞计数变化进行统计分析。结果 复方马齿苋液和氢化可的松对模型鼠红斑、水肿、渗出的接触性皮炎损害均有明显抑制作用，可减轻由于充血、水肿等炎症反应导致的局部皮损重量增加，减少皮损部位炎性细胞浸润。以上两组的抗炎作用明显优于阴性对照组(P0．05）。结论 复方马齿苋液对迟发型变态反应引起的小鼠接触性皮炎具有明显抑制作用。 　　【关键词】 复方马齿苋液；接触性皮炎；迟发型超敏反应；小鼠模型 　　 　　为了探讨中药制剂复方马齿苋液对湿疹皮炎疗效及对迟发型超敏反应的作用机理，我们应用复方马齿苋液对2，4-二硝氯苯(2，4-DNCB)致敏和诱发的小鼠实验性接触性皮炎的疗效和机理进行了研究，现报告如下。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1．1 动物实验 动物ＩＣＲ小鼠，体质量20～25 g，由成都中医药大学动物实验中心提供。 　　1．2 药品与试剂 复方马齿苋液:主要药物为马齿苋30g、苦参30g、白鲜皮30g、五倍子30g、诃子30 g。应用韩国东华煎药机制成水煎剂。以8 ml/kg作为人体的每天剂量，根据人体和鼠的体质量换算出小鼠(体质量25g)的每天等效剂量为0．2 ml。以该剂量的5倍、即1 ml作为鼠的每天剂量，对致敏诱发17 d的小鼠接触性皮炎模型进行2次/d、每次0．5 ml/次胃饲治疗。氢化可的松琥珀酸钠购自天津市药业集团，以4 mg/50 kg的人体每天剂量，根据人体和鼠的体质量换算出小鼠(体质量25 g)的每天等效剂量为0．1 mg，以该剂量的5倍、即0．5 mg作为鼠的每天剂量，2次/d、0．25 mg/次胃饲治疗。2，4-DNCB购自北京市化学试剂公司，用丙酮配制成5%和1%的2，4-DNCB丙酮溶液(以下称DNCB)。 　　1．3 模型制作与分组 参考DNCB诱发的迟发型超敏反应模型相关文献[1，2]，对鼠进行接触性皮炎致敏与诱发:实验当日剃除小鼠背部3 cm2毛、暴露皮肤，在去毛处皮肤外涂5%。ＣＢ。10 ｄ后在小鼠右壳耳内外两侧外涂1%DNCB30 μl，在小鼠左耳壳内外两侧外涂丙酮30μl。15 ｄ后重复诱发1次。17 ｄ后可制得接触性皮炎模型。接触性皮炎模型鼠40只，随机分为3组，即复方马齿苋液组、氢化可的松组和生理盐水组，每组10只，雌雄各半。2次/d胃饲，连续应用6ｄ。 　　1．4 观察项目 ①治疗前后耳壳皮损严重度记分:按右耳皮 　　肤损害程度进行记分，耳壳有明显红斑、水肿及渗出者为3分；红斑、水肿伴少量渗出者为2分；轻度红斑、水肿无渗出者为1分；正常皮肤为0分；②治疗后耳壳增重值测定:用6 mm打孔器取左右耳壳各1片，在电子天平称重，右耳与左耳的重量之差为耳壳增重值；③治疗后右耳壳皮损病理改变和浸润细胞观察:在ＨＥ切片下观察耳壳病理改变，光镜下用网格目镜测微尺以单盲法计数每平方毫米炎性细胞数(包括单一核细胞、多形核白细胞)。 　　1．5 统计学方法 统计数据以均数±标准差(x±s)表示，计量资料比较采用ｔ检验，用SPSS 10．0软件版及χ2检验进行统计学分析。双侧Ｐ0．05差异有统计学意义。 　　 　　2 结果 　　 　　2．1 各组皮损组织病理变化比较 致敏诱发后第17天的模型鼠右耳壳呈现红斑、水肿、渗出改变，皮损组织病理表现为表皮细胞间、细胞内水肿、表皮内水疱，表皮、真皮和皮下组织密集炎症细胞浸润，以单一核细胞为主、间杂少量多形核白细胞，符合接触性皮炎临床和病理改变。左耳皮肤无红斑、水肿，组织病理亦未见炎症反应。 　　2．2 治疗前后右耳壳皮损严重度积分变化结果 见表1。 　　2．3 治疗后右耳壳增重值及皮损炎症细胞计数变化结果 见表2。 　　 　　3 讨论 　　 　　复方马齿苋液是在我院皮肤科在临床经验基础上总结的一个治疗急性湿疹的纯中药制剂，具有清热除湿、祛风止 　　痒功效，临床用于湿热型急性、亚急性皮炎湿疹。2，4-DNCB是一种致敏剂，可致敏和诱发小鼠皮肤出现典型的接触性皮炎损害。但对致敏、诱发时间和DNCB浓度方面报道不一[1-3]。应用尤氏等的动物模型制作方法[4]，可使ＩＣＲ小鼠皮肤在相对短的时间内出现典型的接触性皮炎损害。实验中，鼠耳壳增重值测定、皮损炎症细胞计数均按文献[3]方法进行。在皮损严重度判断标准上，采用根据红斑、水肿、渗出程度进行记分的方法。研究结