牛样品采集与运送方案-安徽动物疫病预防与控制中心.DOC

11 - 附件4: 牛样品采集与运送方案 牛样品既可以按以前的方式进行甲醛固定处理，也可以按下面方案一的方式进行冷冻保存，然后运送至检测实验室进行检测。具体方法见《方案一：新鲜牛脑样品的采集与运送方案》和《方案二：甲醛固定的牛脑样品的采集与运送方案》。参考实验室建议采用方案一的规定进行采样和运送，该方案也是当前国际上广泛采纳的方案。 方案一：新鲜牛脑样品的采集与运送方案 1．专用采样工具采集牛脑样品的特点： 国家牛海绵状脑病参考实验室根据国际上通用的牛脑采样工具设计出我国的牛脑样品采样工具。该工具为塑料制品，呈勺子形状，前端带有锋利的齿，便于切断脑组织。这种采样方式有着非常明显的优点，如使用简单、节约成本、工作效率高、机动性强、采样安全。 2. 采样物品准备： 数码照相机（或数码摄像机）、专用的采样勺（一把勺子最多可以采集三份样品，牛脑采样勺为蓝色）、医用剪刀（一把，长10cm左右）、一次性手套、橡胶检查手套（即乳胶手套）、口罩、工作服、样品杯（可向参考实验室索取）、记号笔、冰袋（至少3块大号的冰袋）、大号的透明胶带、带盖泡沫箱（有厚度，无破损，大小适中）、签字笔或圆珠笔、采样单（见附件3）、吸水纸等。 3．采样步骤： （1）如果有比较典型的BSE疑似牛，则要拍照或摄像留下证据。要对临床疑似牛进行拍照或摄像，并且收集临床疑似牛的其他材料如档案等。采集临床疑似牛时，采样人员还需要通过问询等方式弄清该病牛的其他情况，问询内容可以包括饲养历史、来源、流动等情况。这些证据材料必须存档和备份，运送样品时一并寄送至检测实验室。 （2）每次采样至少有两人在场，其中一人戴好一次性手套和橡胶检查手套，另外一人专门登记和开启样品杯（见图1）而不需要戴手套。通过观察牙齿检查牛的年龄（见附录2），大于3岁的牛（第二对永久门齿长出）才可以采样，但如果该动物为疯牛病或痒病风险动物则没有年龄限制。 （3） 在平整地面倒置牛头，即牛头的两角和鼻子靠地放置。同时，另外一人开始填写采样单，并且在样品杯上标记上对应的样品编号（以县/市名+序号，如合肥1号）。一个样品杯只能装一个脑样品。 （4）在枕骨大孔处用剪刀剪开脑硬膜（见图2），目的是便于插入采样勺。然后用一个手指伸入枕骨大孔中，沿着延脑（延髓）转一周（见图3），目的是切断延脑与头骨之间相连的神经和血管，以便于脑组织顺利挖出。 （5）从延脑腹侧（也即勺子从枕骨大孔的上面进入，见图4）将采样勺插入枕骨大孔中，插入时采样勺要紧贴枕骨大孔的腔壁，以免损坏延脑组织。采样勺插入的深度约为5-7cm（采羊脑时插入深度约为4 cm），然后向上一扳勺子手柄，同时往外抠出脑组织和勺子，延脑便可完整取出。 注意：尽量保护好延脑“三叉口”处（脑闩部，见图5）的组织的完整性。 （6）将脑组织放入编好号的样品杯中，拧紧杯盖，然后放置在盛有冰袋的泡沫箱中，用透明胶带将泡沫箱的盖子绑紧。 注意：采好的样品必须在5小时之内放入冰柜中冷冻上，以防腐败；样品至少要冷冻24小时才能往疯牛病检测实验室运送。 （7）各地送来的样品要先在省兽医总站里统一清理，如果没有冷冻好的样品，则必须及时放入冰柜中冷冻，然后由省兽医总站统一将样品发送至检测实验室。 4．样品运送： 准备好带盖的结实的泡沫箱，该泡沫箱必须无任何破损，并且大小适中（根据样品的量来决定）。先在泡沫箱的底部铺上一层吸水纸，之后放入冷冻好的样品，然后在侧面放入几块冷冻好的冰袋，最后在样品的上面放入几块冷冻好的冰袋，盖紧箱盖。用大号的透明胶带封好箱口，再横向打好包，箱子外面用记号笔写上“易碎勿压”以及向上的“箭头”等字样，然后由省动物疫病预防控制机构统一运送。打好包的样品必须及时发送，并确保4天之内运送至检测实验室。 提示：一、这种包裹最好通过航空途径运送或由专人运送，并切记要注明“易碎勿压”。二、切记在采样单上写明送样人及其联系方式，样品检测完后实验室要出具检验报告并寄给送样人。 方案二：甲醛固定的牛脑样品采集与运送方案 1．材料 （1） 数码照相机（或数码摄像机）、采样单、复写纸和圆珠笔或铅笔 （2） 医用胶布（用于捆装有样品的纱布，并在其上写上样品编号） （3） 电动骨锯或采样勺、骨钳、斧头 （4） 解剖刀、剪刀、乳胶手套 （5） 纱布、棉线、密封塑料桶（容积不少于5000ml） （6） 固定液：即10%福尔马林（甲醛）生理盐水 氯化钠8.5g ；水900ml ；40%福尔马林（甲醛）100ml 2．采样步骤 （1）如果有比较典型的BSE疑似牛，则要拍照或摄像留下证据。要对临床疑似牛进行拍照或摄像，并且收集临床疑似牛的其他材料如档案等。采集临床疑似牛时，采样人员还需要通过问询等方式弄清该病牛的其他情况，问询内容可以包括饲养历史、来源、流动等情况。这些证据材料必须存档和备份，运送样