2.2.1动物细胞培养和核移植-Elaine -1幻灯片.pptVIP

（2）医药卫生领域： 克隆动物作为生物反应器，生产大量医用蛋白 克隆动物（也经过转基因操作）的细胞、组织、器官可作为异种移植的供体 与基因工程的综合应用 乳汁中分泌人抗胰蛋白酶的转基因羊 人造耳朵有望用于器官移植 ★ ③核移植形成的病人的胚胎干细胞经诱导分化，形成相应组织、器官用于组织器官的移植 * 　2001年一只在背上长出了“人耳”的活老鼠（见上图）在北京亮相，这是863计划组织工程研究的成果。由国家重点基础研究发展规划项目首席科学家曹谊林教授领导研究的这项技术，首先用高分子化学材料——聚羟基乙酸制成所需人体器官的形状，然后植入人的细胞（这只展出的老鼠身上植入的是它自己的细胞），缝合在裸鼠背上。经过细胞快速生长，人造模子会自己降解消失，器官与老鼠成为一体，最后可移植到人体上。这种全身无毛的老鼠叫裸鼠，没有免疫力，这样才不会对那只“人耳”产生排异反应。这项技术能应用于人体组织、器官的再造。这项科研技术成熟后，人身上缺少或损坏的组织器官都可以修补上。 * 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 * 单层贴壁的猪输卵管上皮细胞 2.2 动物细胞工程 细胞工程 植物细胞工程 动物细胞工程 动物细胞培养技术 核移植技术 动物细胞融合技术 单克隆抗体 ★ 植物组织培养技术 植物体细胞杂交技术 ★ 1、概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 据此推测动物细胞培养技术的一般思路： 动物组织离体 分散 一定条件培养 一、动物细胞培养 问题：怎样进行动物细胞培养？ 过程： 任务：阅读教材，重点了解以下名词。 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞就会停止分裂增殖。 动物组织消化后的初次培养 贴满瓶壁厚的细胞需要重新处理，然后分装继续培养，让细胞继续增殖的过程 10代 10~50代 50代以上 保持正常的二倍体核 选材 稀释成细胞悬液 剪碎并用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 原代培养 分散成单个细胞 加培养液 转入培养液中进行原代培养 细胞贴壁→生长→增殖（不分化） 细胞贴满瓶壁 重新用胰蛋白酶进行处理 传代培养 （出现接触抑制，停止增殖） 2、流程图 （取动物胚胎或幼龄动物的组织块） [其中的细胞分化程度低，增殖能力强] 转入培养液中进行传代培养 习 题 1．关于动物细胞培养的叙述错误的是(　　) A．用于培养的细胞最好取自健康动物体内的组织细胞 B．将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理并分散成单个细胞，再稀释制成细胞悬液培养 C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶进行处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖 D．传代培养的细胞在传至10～50代左右时，增殖会逐渐减慢，以至于完全停止，所培养的细胞全部衰老死亡 D 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和pH： 4、气体环境： 3、动物细胞培养的条件： （无菌操作；添加一定量的抗生素；定期更换培养液） ( 36.5±0.5℃ 7.2-7.4) （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等） O2和CO2（95%空气和5% CO2） 清除代谢产物 目的： 维持培养液的pH 目的： 防止杂菌污染 为什么还要加血清或血浆？ 答：人们对细胞所需的营养物质没有完全搞清楚，加入天然血清可以保证细胞的营养需求 返回 与植物培养基相比其特点是： （1）液体培养基 （2）含有动物血清 动物体细胞大都生活在液体的环境 动物细胞培养基和植物组织培养培养基相比有什么差别？ 思考： 细胞的全能性 大量细胞 植物植株 培养结果 获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 依据原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 4、动物细胞培养与植物组织培养的比较 大规模培养细胞以生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 5、动物细胞培养的应用 大规模培养细胞以生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养细胞用于检测有毒物质 5、动物细胞培养的应用 大规模培养细胞以生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养细胞用于检测有毒物质 培养正常或病变细胞用于研究： 如：筛选抗癌药物 5、动物细胞培养的应用 1、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其