急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征患者NPM基因突变研究.pdfVIP

急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征患者 NPM 基因突变的研究 张悦 张美荣 杨琳 肖志坚 作者单位：300020 天津，中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院； 实验血液学国家重点实验室 基金资助：天津市自然科学基金（05YFJMJC02000 ），高等学校博士学科点专项科研基 金（20050023033 ） 通信作者：肖志坚 通信地址：300020 天津市南京路 288 号中国医学科学院血液学研究所 FAX ：022 TEL ：022 Email: zjxiao@ 1 【摘要】目的 探讨染色体核型正常原发性急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合 征（MDS ）患者NPM 基因突变。方法 染色体核型正常的原发性 AML 患者 40 例（28 例 为初治患者，12 例位首次完全缓解期患者），MDS 患者 38 例，用基因组 DNA PCR 法扩增 NPM 基因第 12 外显子，PCR 产物纯化后直接测序，发现突变患者，将 PCR 产物克隆至 pUCm-T 载体，转化大肠杆菌 DH5 α，至少挑选 5 个以上重组克隆，小量制备质粒后进行 测序。结果 共发现 NPM 突变患者 6 例（AML 4 例，MDS 2 例），A 型突变 4 例，B 型突变 1 例，新发现突变 1 例（我们将之命名为 R 型）。结论 新发现了一个 NPM 突变类型并在 国内外首次证实 MDS 患者也存在有 NPM 基因突变，为进一步研究 NPM 突变与 AML 及 MDS 发生的关系提供了重要的新线索。 【关键词】白血病，急性，髓系；骨髓增生异常综合征；NPM 基因；突变 Studying of Nucleophosmin (NPM) gene mutations in patients with acute myeloid leukemia and myelodysplastic syndromes ZHANG Yue, ZHANG Mei-rong, YANG Lin, XIAO Zhi-jian. Institute of Hematology, Chinese Academe of Medical Sciences Peking Union Medical College, Tianjin 300020, China Corresponding author: XIAO Zhi-jian, Email: zjxiao@ 【Abstract 】Objective To investigate Nucleophosmin (NPM) gene mutations in patients with primary acute myeloid leukemia(AML) and normal cytogenetics and in patients with primary myelodysplastic syndromes(MDS). Methods Genomic DNA corresponding to exon 12 of NPM gene were amplified by polymerase chain reaction(PCR) in 40 patients with primary AML and normal karyotype （28 cases were new diagnosed and 12 patients were in first remission ）and 38 patients with MDS. The PCR products were purified and screened by direct sequencing, if mutations were found , the PCR products