宫颈癌患者外周血及组织中Th17细胞Treg细胞表达及Th17Treg失衡研究.docVIP

宫颈癌患者外周血及组织中Th17细胞Treg细胞表达及Th17Treg失衡研究 　　[摘要] 目的 探讨宫颈癌患者外周血及组织中Th17细胞、Treg细胞表达及Th17/Treg失衡的意义。 方法 分别选取同期53例宫颈癌、25例CIN和25例子宫全切患者作为研究对象，采用流式细胞仪检测外周血和宫颈组织中Th17细胞、Treg细胞表达。 结果 宫颈癌组、CIN组外周血中Th17细胞、Treg细胞表达及Th17/Treg均显著高于对照组（P 0.05）。外周血Th17细胞表达与FIGO分期呈正相关（P 0.05），Treg细胞表达与分化程度呈负相关（P 0.05）。组织中Th17/Treg与FIGO分期呈负相关（P 0.05）。 结论 宫颈癌患者外周血和组织中Th17细胞和Treg细胞表达均显著升高，Th17/Treg失衡在宫颈癌发生发展过程中起重要促进作用。 　　[关键词] 宫颈癌；Th17细胞；Treg细胞；Th17/Treg平衡 　　[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2014）10-0015-03 　　宫颈癌是导致女性死亡最主要的恶性肿瘤之一，免疫系统功能异常在肿瘤发生、发展过程中起重要的作用。Th17细胞、Treg细胞均属CD4+ T细胞亚群，介导细胞因子发挥不同的免疫效应，两者存在动态平衡关系，Th17/Treg失衡参与多种炎症、自身免疫性疾病及肿瘤的发生发展过程，均与肿瘤的免疫逃逸密切相关[1，2]。本研究旨在探讨Th17细胞、Treg细胞在宫颈癌进展中的作用，及Th17/Treg失衡对宫颈癌发生发展的影响。 　　1 资料与方法 　　1.1 临床资料 　　选取2012年2月～2013年4月我院收治的53例宫颈癌患者作为宫颈癌组研究对象，均经病理学检查证实为宫颈癌并结合影像学检查明确分期，其中鳞癌35例，腺癌18例，年龄39～69岁，平均（53.23±6.99）岁，FIGO临床分期Ⅰ期10例，Ⅱ期12例，Ⅲ期20例，Ⅳ期11例；另选取同期与宫颈癌组年龄匹配的CIN患者25例为CIN组研究对象，标本来源于宫颈锥切手术标本、病理活检组织及外周血，均经病理学检查证实，CIN1级7例，CIN2级10例，CIN3级8例；再选取同期与宫颈癌组年龄匹配行子宫全切并排除恶性病变及癌前病变患者25例为对照组研究对象，标本来源于子宫全切手术标本及外周血。 　　1.2 主要试剂及仪器 　　荧光抗人CD4-FITC、抗人CD25-APC、抗人Foxp3-PE、抗人IL-17-PE、抗人ROR-γt-PE单克隆抗体及相应同型对照抗体，固定及破膜试剂盒、人Foxp3试剂盒、人IL-17试剂盒、人ROR-γt试剂盒、人T细胞检测试剂盒（美国eBiosciences公司）。美国BD公司FACS Caliber流式细胞检测仪。 　　1.3 实验方法及观察指标 　　外周血标本于术前或病理活检前采集空腹外周静脉血5 mL，常规分离外周血单个核细胞，采用流式细胞技术定量检测抗人CD4-FITC、抗人CD25-APC、抗人Foxp3-PE、抗人IL-17-PE、抗人ROR-γt-PE单克隆抗体分别标记的Th17细胞和Treg细胞。宫颈组织标本冲洗后取新鲜组织剪碎，经组织消化液消化形成组织细胞悬液，分离单个核细胞，采用流式细胞仪技术定量检测Th17细胞和Treg细胞。每份样本至少收集10 000个单个核细胞。 　　1.4 统计学处理 　　应用SPSS 18.0进行统计学处理，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用方差分析，两两比较采用q检验及t检验，相关性采用Pearson或Spearman秩相关分析，P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 宫颈癌组、CIN组和对照组外周血中Th17细胞、Treg细胞表达及Th17/Treg比较 　　宫颈癌组、CIN组外周血中Th17细胞、Treg细胞表达及Th17/Treg均显著高于对照组（P 0.05），宫颈癌组又显著高于CIN组（P 0.05）。见表1。 　　表1 宫颈癌组、CIN组和对照组外周血中Th17细胞、Treg细胞表达及Th17/Treg比较（x±s，%） 　　注：qa为宫颈癌组与CIN组比较，*P 0.05 　　2.2 宫颈癌组、CIN组和对照组组织中Th17细胞、Treg细胞表达及Th17/Treg比较 　　宫颈癌组、CIN组组织中Th17细胞、Treg细胞表达均显著高于对照组，Th17/Treg均显著低于对照组（P 0.05），宫颈癌组Th17细胞、Treg细胞高于CIN组（P 0.05），Th17/Treg低于CIN组。见表2。 　　表2 宫颈癌组、CIN组和