实验五蛋白质的颜色反和沉淀反应.pptVIP

实验五 蛋白质的颜色反应及沉淀反应 ;蛋白质颜色反应原理;常见的蛋白质颜色反应;（一）米伦氏（Millon）反应;（二）双缩脲反应;（三）黄色反应;（五）乙醛酸反应 　　含色氨酸的蛋白质在浓硫酸中与一些醛类反应能形成有色物质。此反应可作为色氨酸的定性定量反应。;蛋白质沉淀反应原理;常见的蛋白质沉淀反应;（一）蛋白质盐析作用 　　原理：向蛋白质溶液中加入中性盐（硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等）至一定浓度，使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。沉淀不同的蛋白质所需中性盐的浓度也不同。;（三）重金属盐沉淀蛋白质 　　原理：当溶液PH大于等电点时，蛋白质颗粒带负电荷，这样它就容易与重金属盐（如Cu2+、Ag+、Hg2+、Pb2+等）结合形成不溶性盐类而沉淀。;（五）有机酸沉淀蛋白质 　　原理：当溶液PH小于等电点时，蛋白质颗粒带正电荷，容易与某些有机酸如三氯乙酸和磺基水杨酸等的酸根负离子发生反应生成不溶性盐而沉淀。这个反应可将生物体液中的蛋白质完全清除。;（七）加热沉淀蛋白质 　　原理：几乎所有的蛋白质都因加热变性而凝固，变成不可逆的不溶状态。盐类和氢离子浓度对蛋白质加热凝固有重要影响。少量盐类促进蛋白质的加热凝固。当蛋白质处于等电点时，加热凝固最完全、最迅速。在酸性或碱性溶液中，蛋白质分子带有正电荷或负电荷，虽加热蛋白质也不凝固。若同时有足量的中性盐存在，则蛋白质可因加热而凝固。 　　加热变性引起蛋白质凝固沉淀的原理可能是由于热变性使蛋白质天然结构解体，疏水基外露，因而破坏了水化层，同时由于蛋白质处于等电点也破坏了带电状态。;实验注意事项;思考题