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沙 门 氏 菌 属 简 介 沙门氏菌属是一群符合肠杆菌科定义并与其血清学相关的革兰氏阴性、需氧性、无芽孢杆菌。本菌属种类繁多，抗原结构复杂，现已发现2000多个血清型，我国已发现血清型近200个。 形态特征： 革兰氏阴性，大小为1~3×0.4~0.9μm的两端钝圆的短杆菌，无芽孢，一般无荚膜，除鸡沙门氏菌和雏沙门氏菌以外，都有周身鞭毛，运动力强。 沙门氏菌属的生物学特性 培养特性： 沙门氏菌需氧或兼性厌氧，10～42 ℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH为6.8～7.8。 营养琼脂平板上：35～37℃培养18~24h，其菌落大小一般为2～3mm，光滑、湿润、无色、半透明、边缘整齐。 血平板上：中等大小的灰白色菌落。 生化特性： 绝大多数沙门氏菌有规律的发酵葡萄糖产酸产气，但也有不产气者，不发酵蔗糖和侧金盏花醇、不产生吲哚、不分解尿素。 范 围 本标准规定了食品中沙门氏菌（Salmonella ）的检验方法。 本标准适用于食品中沙门氏菌的检验。 设 备 和 材 料 ★冰箱：2 ℃～5 ℃。 ★恒温培养箱 ★均质器 ★振荡器 ★电子天平：感量0.1g ★无菌锥形瓶:容量500mL，250 mL ★无菌试管 培 养 基 和 试 剂 缓冲蛋白胨水（BPW ） 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液 亚硫酸铋（BS ）琼脂 HE 琼脂 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD ）琼脂 沙门氏菌属显色培养基 三糖铁（TSI）琼脂 沙门氏菌检验程序 分群：取一张洁净玻片，取满两环沙门氏 菌多价O血清（A-E群）至玻片上，再用接种环挑取疑为沙门氏菌的纯培养物少许，与玻片上的多价O血清混匀，再稍动玻片，若在2分钟内出现凝集现象，即可初步确定该菌为沙门氏菌（以生理盐水做对照，排除细菌自凝的可能）。再用代表A群(O2)、 B群(O4)、 G1群(O7)、 C2群(O8)、 D群(O9)与 E群(O3)的O因子血清做同样的玻片凝集试验，视其被那一群O因子血清所凝集，则确定被检沙门氏菌为该群。 定型：用该群所含的各种O因子血清和被检菌做玻片凝集试验，以确定其含哪些O抗原。同样，用该群H因子血清与被检菌做玻片凝集试验，以确定其H抗原。根据检出的O抗原和H抗原列出被检菌的抗原式，查对沙门氏菌的抗原表，即可知被检菌为哪种沙门氏菌， 称取25 g （mL ）样品放入盛有225 mL BPW 的无菌均质杯中，以8 000 r/min～10 000 r/min 均质 。 1 min～2 min，或置于盛有225 mL BPW 的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH 值，用 1 mol/mL 无菌NaOH 或HCl 调pH至6.8±0.2。 无菌操作将样品转至 500 mL 锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于 3℃±1 ℃培养8 h～ 18h。如为冷冻产品,应在45 ℃以下不超过 15 min,或2 ℃～5 ℃不超过 18 h 解冻。 表1 沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 表5 沙门氏菌属各生化群的鉴别 Ⅱ 反应序号 A2：补做甘露醇和山梨醇试验，沙门氏菌靛基质阳性变体两项试验结果均为阳性，但需要结合血清学鉴定结果进行判定。 返回 Ⅲ 反应序号A3： 补做ONPG。 ONPG 阴性为沙门氏菌，同时赖氨酸脱羧酶阳性,甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。 返回 注：+阳性；-阴性。 _ + + _ - _ KCN _ _ _ + + _ 丙二酸盐 _ + _ + _ _ ONPG _ _ + _ _ _ 水杨苷 _ + + + + + 山梨醇 _ + _ _ + + 卫矛醇 Ⅵ Ⅴ Ⅳ Ⅲ Ⅱ Ⅰ 项目 Ⅳ 必要时按表5 进行沙门氏菌生化群的鉴别。 * * * * * * 伤寒沙门氏菌 沙 门 氏 菌 典 型 群 落 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 National food safety standard Food microbiologial examination:Salmonella 2010-03-26发布 2010-06-01实施 中华人民共和国卫生部 发布 本标准代替GB/T 4789.4-2008 《食品卫生微生物检验沙门氏菌检验》。 本标准与GB/T 4789.4-2008 相比，主要变化如下： ——修改了标准的中英文名称；