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XAV939对卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及顺铂增敏作用-妇产科学专业论文
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学位论文作者: 日期: 年 月 日
摘要
摘要
XAV939 对卵巢癌 SKOV3 细胞的生长抑制 及顺铂增敏作用
姓名:王燕利 导师:王武亮
郑州大学第二临床学院 妇产科 河南 郑州 450014
摘要
背景与目的
卵巢癌,以卵巢上皮性癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)为主,是女性 妇科肿瘤相关死亡的主要原因,也是妇科最致命的恶性肿瘤。据统计,1999-2010 年间我国卵巢癌的总体粗死亡率为 7.91/10 万,年龄校正总死亡率为 5.35/10 万 HYPERLINK \l _bookmark7 [1]。 由于缺乏用于早期诊断的特异性指标及该病发病的隐匿性,大部分卵巢上皮性 癌患者因症状出现而就诊时已处于临床晚期,而传统的化疗方案则因癌细胞化 疗药物抗性的产生难以达到治疗效果,使得该病的治疗遇到了前所未有的挑战 HYPERLINK \l _bookmark8 [2]。因此,更好地研究与卵巢癌发生发展及耐药性获得相关的分子机制,从而找 到早期诊断灵敏度高的特异性指标和针对性强且副作用小的分子靶向治疗药物 已迫在眉睫。
最近一些国内外学者均发现,目前在肿瘤治疗方面研究相当火热 的 Wnt/β-catenin 通路的活化可能参与了卵巢癌的发生发展及其化疗药物的耐受 HYPERLINK \l _bookmark9 [3; HYPERLINK \l _bookmark10 4]。研究证明在卵巢上皮性癌中存在一些表达上调的 Wnt/β-catenin 通路成员蛋 白,例如细胞外信号蛋白 Wnt-1、通路核心蛋白 β-catenin 及下游靶基因转录蛋 白 c-myc、cyclinD1,其中 β-catenin 参与了卵巢癌细胞的异常增殖和转移。因此, 如果找到可以抑制该通路中任意环节的靶向性药物,我们便有望解决化疗药物 毒副作用大和肿瘤耐药这两大世界性难题,为每一位肿瘤患者带来希望。
端粒酶作为端粒长度的“守卫员”,早在上世纪末就被证明在许多恶性肿瘤
I
中表达上调,其中也包括妇科死亡率最高的卵巢癌,Murakami 等 HYPERLINK \l _bookmark11 [5]通过对卵巢 良性、交界性及恶性肿瘤组织的分析发现,92%的组织中端粒酶呈现高表达,且 肿瘤分化程度与酶的活性呈现负相关。目前,有不少学者正在尝试将端粒酶的 特异性抑制剂应用于肿瘤的治疗中,主要集中于肝癌、鼻咽癌、胃癌及卵巢癌 等方面,也取得了一定的成效,但并没有为肿瘤的获得性药物耐受问题带来帮 助。
端锚聚合酶(Tankyrase)是一种多功能蛋白酶,其一方面利用糖基化功能 抑制 Tankyrase1/2 的活性,为端粒酶提供作用位点并维持染色体末端稳定性;另 一方面则可增加锚蛋白的稳定性,进而加速 β-catenin 降解,介导 Wnt/β-catenin 通路的正向运行。XAV939 是 Huang, S. M 等 HYPERLINK \l _bookmark12 [6]学者于 2009 年基于抑制 β-catenin 转录而筛选出的 Wnt/β-catenin 通路特异性小分子抑制剂,他们利用定量化学蛋 白质组学方法发现,其发挥作用主要依赖于介导锚蛋白稳定性的增加,促进该 通路的“开关蛋白”β-catenin 的降解,进而对肿瘤达到治疗效果。
本次研究将端锚聚合酶抑制剂 XAV939 作用于人卵巢腺癌顺铂原发耐药细 胞株(SKOV3 细胞株),并检测细胞用药后的增殖、凋亡情况及细胞核质内 Tankyrase、cyclinD1 和 β-catenin 的表达情况,以期为卵巢癌小分子靶向治疗药 物的研发和耐药的逆转提供新的方向。
材料与方法
人卵巢癌 SKOV3 细胞体外复苏并培养至对数期,将这些细胞分为端锚聚合 酶抑制
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