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波形蛋白在子宫颈鳞癌中表达及临床意义 　　【摘要】 目的 探讨子宫颈鳞癌组织中波形蛋白（Vimentin）的表达及其与临床特征之间的关系。 　　方法 选取12例子宫颈上皮正常患者、13例宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ级患者、21例CINⅡ～Ⅲ级患者、42例子宫颈鳞癌患者作为研究对象， 采用免疫组化法检测其组织中Vimentin表达情况， 观察不同组织类型的Vimentin表达差异及子宫颈鳞癌Vimentin表达与临床病理特征的相关性。结果 正常的子宫颈上皮细胞组织中Vimentin的表达率为0（0/12）， 均呈阴性；CINⅠ级组织中Vimentin的高、低表达率分别为0（0/14）、23.1%（3/13）；CINⅡ～Ⅲ级组织Vimentin的高、低表达率分别为0（0/21）、47.6%（10/21）；子宫颈鳞癌组织中Vimentin的高、低表达率分别为16.7%（7/42）、71.4%（30/42）；不同组织间Vimentin表达率比较差异具有统计学意义（P0.05）。Vimentin表达与子宫颈鳞癌临床分期以及淋巴转移呈明显相关关系（r=0.816、0.799， P=0.007、0.0400.05）。结论 Vimentin表达的升高对子宫颈鳞癌的发展起重要推动作用， 且Vimentin表达与淋巴转移等有密切关系。 　　【关键词】 子宫颈鳞癌；波形蛋白表达；临床特征；病理特征 　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.023 　　子宫颈癌是严重威胁妇女生命健康的生殖系统恶性肿 　　瘤[1]。以往研究发现人乳头瘤状病毒（HPV）感染与宫颈癌的发生密切相关， 但具体发病机制仍不清楚。已有研究表明 [2]， 在人乳头瘤状病毒感染的正常上皮细胞中发生上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition， EMT）现象[3]。Vimentin是一种重要的Ⅲ型中间丝纤维蛋白， 可作为组织病理学诊断中鉴别肿瘤细胞分化起源的特异性生物标记物[4]。Vimentin的高表达意味着EMT过程的发生开启了肿瘤转移过程， 是引起肿瘤侵袭转移的关键步骤。作者观察了Vimentin在宫颈癌及其前期病变中的定位与表达水平， 探讨Vimentin表达情况与临床特征之间的关系， 报告如下。 　　1 资料与方法 　　1. 1 一般资料 选取2015年6月～2017年6月辽阳市第五人民医院收治的12例子宫颈上皮正常患者（行全子宫加双附件切除子宫肌瘤）、13例CINⅠ级患者、21例CINⅡ～Ⅲ级 　　患者、42例子宫颈鳞癌患者作为研究对象， 所有患者在手术前都没有采取任何治疗措施。所有患者的诊断均经过经病理检查证实。子宫颈鳞癌患者年龄31～59岁， 平均年龄48岁；CINⅠ级患者年龄31～56岁， 平均年龄47岁；CINⅡ～Ⅲ级患者年龄29～58岁， 平均年龄46岁；子宫颈上皮正常患者年龄40～60岁， 平均年龄51岁。各类型患者年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P0.05）， 具有可比性。 　　1. 2 方法 采集所有研究对象子宫颈组织制作标本， 标本经常规多聚甲醛固定、连续切片、石蜡包埋。所采集的标本经液氮冷冻后， 转入-70℃冰箱中保存备用[5]。免疫组织化学用链霉菌抗生物素蛋白-?^氧化物霉连结法（SP）法， 用己知阳性片作阳性对照， 磷酸盐平衡生理盐水（PBS）代替一抗作阴性对照。将切片进行脱蜡至水；并置于构椽酸盐中， 进行高压修复抗原， 2 min后取出， 冷却至室温；采用3%浓度的过氧化氢封闭， 将内源性的过氧化氢酶去除；滴加一抗 　　（50 μl）后， 在37℃下进行孵育， 2 h后用PBS进行冲洗， 连续冲洗3次；再滴加生物素标记二抗（50 μl）， 在室温下进行孵育， 30 min后用PBS冲洗， 连续冲洗3次；再滴加二氨基联苯胺（DAB）溶液（50 μl）， 进行苏木精复染；将复染后的组织进行梯度乙醇脱水， 用二甲苯透明作为透明剂， 用中树胶将染好的切片封存。 　　1. 3 评价标准 Vimentin阳性表达定位于细胞质， 其颗粒染色呈现为黄色和棕黄色。免疫组化评分采用简单的半定量方法， 通过着色程度以及阳性细胞的百分数获得， 其计算公式为：总评分=着色程度评分×着色细胞百分数评分；其中总评分0分为阴性表达， 总评分1～4分为低表达， 总评分4分为高表达。①根据细胞的阳性着色程度（即细胞的抗原含量）评分得出：0分为阴性；1分为弱阳性；2分为中等阳性；3分为强阳性。②在光镜下， 任意选取4个高倍视野（×400）， 计数出200个以上的细胞， 根据阳性细胞的百分数， 评分标准为：0分表示没有阳性细胞；1分表示阳性细胞≤10%；2分表示阳性细胞在11%～50