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油茶叶绿素提取方法比较研究 　　摘要：为寻求油茶?~绿素提取效果最好的方法，以长林4号油茶叶片为试材，研究5种不同提取方法对油茶叶片叶绿素提取效果的影响。结果表明：不同提取方法提取效果差异显著，提取效果最好的是丙酮∶乙醇=2∶1的混合液，其次是丙酮∶乙醇=1∶1的混合液，然后是丙酮∶乙醇∶水=45∶45∶1的混合液，80%丙酮和95%乙醇提取效果相对较差。丙酮∶乙醇2∶1混合液法比较适合油茶叶绿素的提取。 　　关键词：油茶；叶绿素；提取方法 　　中图分类号：S7223文献标识码：A文章编号：1004-3020（2017）06-0011-04ComparisonofChlorophyllExtractionMethodsinCamelliaoleiferaChengGuiwenGongHongenYanSongbaoChenChuansongLuoJiadongYuanXiaopingWuJianguo 　　（TheExperimentalCentreofSubtropicalForestry，CAFXinyu336600） 　　Abstract：InordertofindoutthebestextractionmethodofchlorophyllinCamelliaoleifera，theeffectsoffivedifferentextractionmethodsontheextractionofchlorophyllwerestudied，withCamelliaoleiferaleavesofChanglin4asexperimentalmaterial.Theresultsshowedthatdifferentextractionmethodsshowedsignificantdifferencethe，mixedreagentofacetoneandethylalcoholinratioof2∶1hadthebesteffect，followedbythemixedreagentofacetoneandethylalcoholinratioof1∶1，thenthemixedreagentofacetone，ethylalcoholandwaterinratioof45∶45∶1，80%acetoneand95%ethanolhadrelativelypooreffect.Themixtureofacetoneandethanolinratioof2：1issuitablefortheextractionofchlorophyllfromCamelliaoleifera. 　　Keywords：Camelliaoleifera；chlorophyll；extractionmethods 　　叶绿素是植物进行光合作用最重要的物质之一。早期一段时间叶绿素提取主要采用Arono法[1]，该方法缺点是需研磨、过滤，步骤多，工作量大，且易受光氧化；1976年Shoaf提出了用二甲基亚砜提取藻类叶绿素，1979年Hiscox将该方法用于提取高等植物叶绿素[2]，该方法缺点是二甲基亚砜气味难闻，成本高，且低于19℃就会结晶；1981年古川昭雄提出了用无水乙醇浸泡提取叶绿素的方法[3]，该方法的缺点是提取时间长，提取不完全等；1984年福建林科所陈福明提出了丙酮、无水乙醇和蒸馏水45∶45∶1的混合液浸泡提取叶绿素的方法[4]，随后沈阳农学院张宪政于1985年提出了丙酮和无水乙醇1∶1的混合液法[5]，1992年北京农业大学彭运生又提出了丙酮和无水乙醇2∶1的混合液法[6]。 　　就油茶叶绿素提取而言，虽然目前几种方法都有采用，但提取效果的比较研究尚未见报道。本研究以长林4号油茶叶片为试材，对80%丙酮浸提法[7-15]、95%乙醇浸提法[16-19]、45∶45∶1混合液法（丙酮∶乙醇：水）[20-24]、1∶1混合液法（丙酮∶乙醇）[25-28]和2∶1混合液法（丙酮∶乙醇）[29-32]的油茶叶绿素提取效果进行比较研究，以期为油茶叶绿素含量测定方法的选择提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　选取长林4号盛产期油茶树向阳中上部叶片，擦拭干净，去除大叶脉，剪碎成约10cm×02cm的细丝，遮光混匀备用。 　　1.2试验方法 　　按体积比配制浸提液，共5个处理：①80%丙酮；②95%乙醇；③丙酮∶乙醇=1∶1；④丙酮∶乙醇=2∶1；⑤丙酮∶乙醇∶水=4.5∶4.5∶1。将剪好的细丝称取0.2000g，放入装有浸提液的25ml具塞刻度试管，定容，置于暗处室温浸提24h，每个处理重复3次，期间摇动几次。提取液分别于470、645、663nm波长下测定吸光度（95%乙醇提取液于470、649、66