活血行气方药物血清对人胃癌SGC7901细胞P53 和Bcl2 基因表达影响实验研究.docVIP

活血行气方药物血清对人胃癌SGC7901细胞P53 和Bcl2 基因表达影响实验研究 　　（辽宁中医药大学,辽宁 沈阳 110847） 　　摘 要：目的：研究活血行气方健脾理气方对人胃癌SGC-7901细胞株p53 和Bcl-2 基因表达的影响。方法：利用血清药理学方法制备药物血清,应用Western-blot分析方法观察活血行气方对人胃癌SGC-7901细胞株p53 、Bcl-2基因表达的影响。结果：药物血清作用后,p53 表达明显增强; Bcl-2表达明显降低。结论：活血行气方药物血清上调p53 、下调Bcl-2,达到抑制人胃癌SGC-7901细胞株的作用。 　　关键词：活血行气方；人胃癌SGC-7901细胞；基因 　　中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717（2011）03-0629-02 　　Effect of Huoxuexingqi Formula on expression of p53 and 　　Bcl-2 in the Human Stomach Cell Line SGC-7901 　　QU Ting-ting,CAI Yu-wen 　　（Liaoning University of TCM,Shenyang 110847,Liaoning,China） 　　Abstract:Objective：To research the expression of p53, Bcl-2 gene by Huoxuexingqi formula on Human Stomach Cell Line SGC-7901.Method：To prepare serum by serum pharmacological methods. The protein expression of p53, Bcl-2 were detected by Western blot analysis.Result：After the effect of drug serum,p53 expression increased obviously and Bcl-2 expression was significantly lower .Conclusion：Drug serum of Huoxuexingqi formula can up-regulate p53 ,down-regulate Bcl-2 and achieve the suppression of Human Stomach Cell Line SGC-7901. 　　Key words:Huoxuexingqi；Human Stomach Cell Line SGC-7901;gene 　　 　　收稿日期：2010-10-14 　　作者简介：曲婷婷（1979-），女，山东牟平人，博士研究生，研究方向：中药抗肿瘤机理。 　　通讯作者：蔡玉文（1944－），男，辽宁沈阳人，教授，博士研究生导师，研究方向：中医药抗肿瘤机理研究。 　　 　　近年来中医药治疗肿瘤受到越来越多的关注，活血化瘀行气是中医治疗肿瘤的一个重要原则。胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，全世界范围内仅次于肺癌位居各种恶性肿瘤死因的第二位。本方主要由三棱、莪术、桃仁、红花等活血化瘀药配以赤芍、甘草行气缓急，对于改善胃癌中晚期肿胀、腹满、疼痛等症状有一定的作用。本实验通过活血行气方影响人胃癌SGC-7901细胞株基因表达来研究活血行气方抗肿瘤作用的机制。 　　1 实验材料 　　1.1 细胞株 　　人胃癌SGC-7901细胞株，由中国医科大学细胞培养室提供。 　　1.2 动物及试剂 　　SD大鼠30只，雌雄各半，体重180～220g，由辽宁中医药大学动物室提供。活血行气方（三棱、莪术、桃仁、红花等）、化疗药物顺铂（DDP）均辽宁中医药大学药局提供。鼠抗人p53与Bcl-2（北京中山生物技术有限公司）。 　　1.3 药物血清制备及实验分组 　　传统方法煎制,按成人1天用量定容为65mL折算,按成人65kg体重剂量的10倍量灌胃,即中药1mL/100g大鼠；对照组给予相同剂量生理盐水。给药3天,末次给药后1～2h无菌条件下自下腔静脉采血,离心分离血清,56℃,30min灭活,-20℃保存备用。随机分为正常血清对照组（对照组） ,西药组,中药组，中西医结合组。 　　2 实验方法 　　2.1 细胞培养与药物处理 　　人胃癌SGC?7901细胞株经过常规复苏、传代培养之后,将细胞株接种于培养皿置于37℃,5%，CO2培养箱中培养,倒置显微镜下动态观察细胞形态, 24h后见细胞贴壁生长状态良好,弃培养液,分别加入各组血清,继续培养。 　　2.2 p