常用药品试剂及培养基的配制.doc

常用药品试剂和培养基的配制（一）? ?反应剂 ? ???1、检查葡萄糖试剂 配方一? ? 本尼迪克（Benedict）溶液 （1） 在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克无水碳酸钠。 （2） 在50毫升加热的蒸馏水中溶解8.5克硫酸铜。 把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅拌，如果产生沉淀，要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用（存放时间较久而产生沉淀是，取上层清液使用，不必重新配制）。 本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖，可测出0.15 ～0.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时，如果未知物中有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 配方二??裴林（Fehling）溶液 （1）把34.5克硫酸铜溶于500毫升蒸馏水中。 （2）把125克氢氧化钾（钠）和173克酒石酸钾钠溶解在500毫升蒸馏水中。 上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时，使他们等量的混合，加入待测物的试管内，加热到沸腾。如果有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 2、检查淀粉的试剂 鲁哥氏（Lugol’s）溶液（碘液） 取6克碘化钾溶于20毫升蒸馏水中，搅拌到溶解后，加入4克碘，等碘充分溶解，在加入80毫升蒸馏水，贮存在棕色试剂瓶内。 碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉，也用作染色剂，例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。 3、检查蛋白质的试剂 配方一? ? 米伦（Millon）试剂 在60毫升浓硝酸（比重1.42）中溶解40克汞（水浴加温可助溶），溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释，静置澄清后，取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。 在待测物中加入少量米伦试剂，加热，如果有蛋白质，会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。 配方二? ? 双缩尿试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液。 在3毫升待测物中加入1毫升10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。 4、检查脂肪的试剂 苏丹Ⅲ（Ⅳ）酒精饱和溶液 取0.2克苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ），放入纯酒精中，加热，使它充分溶解，成为饱和酒精溶液，过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。 5、酸碱指示剂 配方一? ? 酚酞试剂和试纸 酚酞试剂??取1克酚酞，溶解在100毫升60%的酒精溶液里，装在试剂瓶内密闭保存。 酚态试纸??取1克酚酞，溶解在100毫升95%酒精溶液里，加入00毫升蒸馏水。把绿纸条放入酚酞溶液中浸湿后，取出，放在无氨气影响处晾干。 酚泰试剂（试纸）??pH值变色范围8.2～10，在酸性和中性溶液中都无色，再碱性溶液中呈深红色。 配方二? ? 红蓝石蕊试纸 取市售石蕊1克，放在80毫升10%酒精溶液中搅拌，使它溶解，然后过滤。把滤液分成两份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸，到出现红色为止。另1份滴入稀氢氧化钠溶液，到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条，随后取出滤纸条，放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干，即的红、蓝两种石蕊试纸。 红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝，蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。 6、检查二氧化碳的试剂 检查二氧化碳的试剂，可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。 配方一? ? 溴代麝香草酚蓝溶液 取0.1克溴代麝香草酚蓝，溶解在100毫升蒸馏水里，滴入少量0.1%氢氧化钾溶液，使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。 溴代麝香草酚蓝溶液pH值变色范围是6.0（黄）～7.6（蓝）。待测物中如果有二氧化碳，会形成碳酸而使溶液变成黄色。 配方二? ? 石灰水 在蒸馏水中加入生石灰（氧化钙），变加边搅拌，直到加入的生石灰不再溶解，呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后，倾出上层清液，用滤纸过滤，放在密闭瓶内保存。 如果测定的物质中有二氧化碳，会生成碳酸钙，使石灰水变浑浊。 7、检查细胞生活力的试剂 检查细胞有无生活力，可用中性红甲基蓝试剂。配制的方法是先分别配制1%中性红溶液和1%甲基蓝溶液，这两种溶液各取1份混合，用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色，而使死细胞全部染成蓝色。 （二）分离液 1、肌细胞分离液 配方一? ? 马克凯郎（Maccallum）液 取1份浓硝酸、2份甘油、3份水，混合后就得到马克凯郎液。 把新鲜的肌肉组织小块（横纹肌、心肌和平滑肌）投入这种溶液里浸渍，分离时间需1～3日。这种溶液尤其适于分离横纹肌核心肌细胞。配方二? ? 氢氧化钾溶液 取35克氢氧化钾，放在100毫升蒸馏水中，加热，使它完全溶解后，在室温下冷却。 把新鲜的肌肉组织块投入氢氧化钾溶液中，浸泡15～30分钟后，肌细胞便可分离。 2、上皮细胞分离液 配方一? ? 福尔马林—氯化钾溶液 称取58.44克氯化钠，用蒸馏水溶解，再稀释到1000毫升，加入2毫升福尔马林。