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体外放射配基结合分析及临床应用 卢汉平 中山大学基础医学院 实验核医学教研室 E-mail:luhp@mail.sysu.edu.cn 受体放射配基结合分析Radioligand Binding Assay of Receptor ,RBA 用放射性核素标记配基与相应的受体行特异性结合反应从而对受体进行定性和定量的方法。 RBA的分类 定性RBA:通过反应的量效关系及某些参数的变化等来判断受体的类型、单位点或多位点系统、受体与配基相互作用的特点 (可逆或不可逆,受体间的合作作用)。 定量RBA:在已知反应性质的基础上,通过结合反应分析组织或细胞中受体数目(binding site,结合位点数)。 受体的免疫组织化学Immunohistochemistry 优点: 强特异性(单个氨基酸水平) 高敏感性 高分辨力 缺点: 半定量 无法测定亲和力 RBA相关的基本慨念 受体(receptor,R) 配基(ligand,L): 激动剂、激动剂、内源性配基 受体与配基结合反应的质量作用定律 K1V1 [R]+[L] [RL] E K2V2 KD: 平衡解离常数 [RT]: 受体初始浓度(总浓度) [LT]:配基初始浓度 [RL]2-[RL][RT+LT+Kd]+[RT][LT]=0 (Goldstein) 受体与配基结合反应的主要特点: 可饱和性(Saturability) 可逆性(Reversibility) 特异性(Specifity) 与生理效应一致性。 受体的分类 四级分类: 类(class) 亚类(subclass) 型 (type) 亚型 (subtype) RBA的基本原理 饱和曲线 受体最大结合容量的表示方式 RBA的基本方法 配基的选择 标记配基: 高亲和力、高特异性 高比活度 高放化纯度(98%) 化学稳定性。 非标记配基 高亲和力 高浓度 受体显像配基基本要求 半衰期适中、发射正电子或单光子、 SA〉3.7TBq/mmol 易穿透生物屏障 代谢行为和作用机制清楚 特异性高 亲和力高 选择性强 标记后具完整的生物活性和药理活性 动态显像时用生理数学模型可作受体密度的模拟定量分析 受体在医学研究中的应用 疾病时受体的变化: 受体数目的变化 受体亲和力的变化 受体特异性的变化 受体的自身抗体 受体-效应器偶联机理异常 受体理论在疾病研究中的应用 探讨疾病的发病机理 受体的变化寻找疾病的病因 根据受体测定结果选择治疗方案 受体变化作为疾病预后指标 寻找防治措施 ? 选择治疗方案 344例乳腺癌内分泌治疗效果与ER、PR的关系___________________________________________________________ 受体状态 治疗例数 有效例数 有效率% ____________________________________________________________ ER+、PR- 91 12 13.2 ER-、PR+ 10 3 30.0 ER+、PR- 125 37 29.6 ER-、PR+ 118 89 75.4 ____________________________________________________________ ER和PR与乳腺癌化疗效果的关系(136例) ____________________________________________________________ 受体状态 治疗例数 有效例数 有效率% ____________________________________________________________ ER+ 25 3 12.0 PR+ 8 0
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