扫描电镜在细胞生物学中历史和应用.PDFVIP

扫描电镜在细胞生物学中的历史与 应用 发布者 ：飞纳电镜 第一张真核细胞的电子显微镜图像诞生于 1945年 ，Ruska家族不仅开发了电子显微镜 （ EM ），而且还在传染病源 （如细菌和病毒 ）的成像领域开创了先河。1949年 ，人们将细 胞镶嵌在聚合物中 ，切成薄片 ，最终获得了细胞内部结构。 在早期的研究中 ，研究者们的焦点集中在细胞器上 ，其中线粒体和内质网被研究得非常透 彻。脑组织的细胞结构也开始使用透射电子显微镜 （TEM ）来观察。在使用透射电子显微 镜 （TEM ）来进行研究期间 ，扫描电子显微镜 （SEM ）才刚刚开始成为观察样品表面形貌 的工具 ，直到 20 世纪 60年代和 70年代才被正式运用 [1]。这篇博客提供了一些最近在细 胞生物学应用研究中涉及到扫描电镜 （SEM ）的案例。 图 1 ：电子显微镜在细胞生物学研究中的应用史 1 图2 ：飞纳电镜下的丝状伪足 图 3 ：飞纳电镜下的细胞 2 如何使用扫描电镜 （SEM ）观察高尔基体基质蛋白对斑马 鱼纤毛功能的影响 Bergen等人 [2] 给出了一个很好的例子。他们在研究中使用高尔基体基质蛋白 ，并使用扫 描电镜观察其对斑马鱼纤毛功能的影响。通过扫描电镜对嗅觉神经上皮细胞纤毛成像分析 ， 可以证明它在两种形态下的不同。 为了能够用二次电子探测器对纤毛进行成像 ，他们必须将样品固定在多聚甲醛中 ，然后逐 级脱水 ，再使用临界点干燥仪进行干燥 ，最后进行喷金处理。 从图像中可以看出在体内的再生表型和短干扰 DNA 的转染 ，会导致光滑的纤毛变成球状 纤毛。因此 ，它们可以显示出最大的高尔基体基质蛋白—巨蛋白 ，在纤毛生成和纤毛长度 的控制中起着重要作用。 如何使用扫描电镜 （SEM ）观察经过碳纳米管处理后人类 巨噬细胞的功能 另一个案例延伸到人体的免疫机能。Sweeney 等人 [3] 观察了经过碳纳米管处理后人类巨 噬细胞的功能变化。肺泡巨噬细胞能够清除肺泡空间的外来物质 （微生物或粒子 ），是免 疫细胞防御的第一道防线。 在用扫描电镜观察巨噬细胞之前 ，先用乙醇对细胞脱水 ，然后 ，在喷金前使用专用的容器 进行封存。扫描电镜 （SEM ）图像能够证明未经处理的巨噬细胞表面有少量的丝状伪足和 一些膜的皱褶 ，而处理过的巨噬细胞被激活 ，表面平滑并有大量的丝状伪足。 此外 ，大量的巨噬细胞在尝试吞噬作用的部位被观察到。得出的结论是 ，长的碳纳米管会 影响巨噬细胞的功能。长的碳纳米管不仅激活了它们的生物活性 ，还降低了吞噬细菌的能 力。这一结果与短碳纳米管的观测结果相反。 希望这两个例子能说明如何用 SEM有效地对细胞生物学进行观察。 3 参考文献 [1] Is EM dead? – Knott Genoud, Journal of Cell Science, 126, 2013. [2] The Golgi matrix proteingiantin is required for normal cilia function in zebrafish – Bergen et al., Biology open, 2017. [3] Functional consequences forprimary human alveolar macrophages following treatment with long, but not short, multiwalled carbon nanotubes – Sweeney et al., InternationalJournal of Nanomedicine, 2015. 关键词 ：微生物 ，生命科学 ，细胞生物学研究 ，细菌研究 关于作者 Dr. Jasmin Zahn Dr. Jasmin Zahn 是台式扫描电镜领导品牌 Phenom-World 的一名应用工程师。她热衷 于探索飞纳产品在各种领域的应用可能性。此外 ，Jasmin还积极和用户分享最经典的应 用案例 ，鼓励他们突破常规显微镜用法 ，