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对蛋白质与KSCN溶液作用沉淀现象研究 　　摘要：通过实验研究、文献查阅等方式，对蛋白质盐析与变性内涵及霍夫梅斯特（Hofmeister）效应进行深入解读，对蛋白质溶液中加入KSCN溶液时出现沉淀的意外现象展开了实证研究。结果表明，KSCN可以促进蛋白质变性，而沉淀的主因在于SCN-对蛋白质分子的影响，即除重金属阳离子外的某些盐的阴离子也能使蛋白质变性。因此，时下课堂教学中出现的一些关于蛋白质盐析与变性的经验性结论还值得商榷，建议教师在教学处理时不应简单地让学生教条式记忆，而要为学生后续发展留足螺旋上升的空间。 　　关键词：蛋白质；KSCN溶液；霍夫梅斯特（Hofmeister）效应 ；实验探究 　　文章编号：1005?C6629（2016）8?C0052?C03 中图分类号：G633.8 文献标识码：B 　　1 问题背景 　　在现行高中化学教材介绍和讨论蛋白质时，盐析和变性等特性的学习与研究通常是中学教学的重点。众所周知，向蛋白质溶液中加入饱和（NH4）2SO4、Na2SO4等浓的无机盐溶液，能够破坏蛋白质溶解形成的胶体结构而降低其溶解性并转变为沉淀析出，这种作用称为盐析；蛋白质遇到重金属盐、强酸、强碱等物质时会生成沉淀并不能在水中重新溶解，从而失去原有活性，这种变化叫做变性。实际教学时，为增加学生的真实性体验，充分认识不同种类的盐溶液对蛋白质盐析和变性过程的影响，笔者在教材内容基础上对学生实验所用的盐类试剂进行了重新取舍，结果发现蛋白质在KSCN溶液中也会出现类似于重金属盐溶液的实验现象。 　　为此，对蛋白质与KSCN溶液作用的沉淀现象展开研究，下面简要回顾自己的探索与发现历程，希望能与广大同行对此问题作进一步深入探讨。 　　2 实证研究 　　实验1 取两支小试管，试管A中加入4mL蛋白质溶液，逐滴滴加饱和（NH4）2SO4溶液，直至出现沉淀。用试管B取适量上述浊液，加入蒸馏水并不断振荡，然后与试管A作对照。 　　实验2 按照实验1中的步骤，改用下列盐溶液与蛋白质作用，观察蛋白质的析出与溶解情况。①饱和Na2SO4溶液；②饱和NaCl溶液；③饱和KSCN溶液；④饱和NH4Cl溶液；⑤AgNO3溶液；⑥PbAc2溶液；⑦CuSO4溶液 　　具体现象见表1。重复以上实验1、2操作多次，结果保持一致。 　　为什么蛋白质在KSCN溶液中出现的沉淀加蒸馏水后不能重新溶解，蛋白质与KSCN的作用究竟是盐析还是变性……大家对此困惑不已。 　　是否可能是试剂中重金属离子浓度过高所致呢？查阅所用KSCN试剂商品标签显示，由上海谱振生物有限公司生产，化学纯（C.P.），KSCN含量?R98.0%，铜的含量?Q0.001%，铅的含量?Q0.001%。根据20℃下的溶解度数据（217g）不难计算出，KSCN饱和溶液中Cu2+、Pb2+的极大值浓度约为3.4×10-4 mol?L-1和1.0×10-4 mol?L-1。 　　实验3 分别配制0.10 mol?L-1的CuCl2、PbAc2溶液。取3个小烧杯，分别加入45mL蒸馏水，依次用普通滴管（1mL试剂约为20滴）向烧杯A中滴加3滴CuCl2溶液，烧杯B中滴加1滴PbAc2溶液，烧杯C中同时滴加3滴CuCl2溶液和1滴PbAc2溶液，振荡均匀后将上述所得盐溶液分别与蛋白质溶液作用，均未出现浑浊或白色沉淀。 　　为进一步排除重金属离子作用的可能性，笔者又购买了市场上其他几种品牌的重金属含量更低的分析纯级试剂（KSCN含量?R98.5%，铜的含量?Q0.0005%，铅的含量?Q0.0005%），生产商分别有上海展云化工有限公司、上海国药集团化学试剂有限公司、山东济宁恒泰化工有限公司、宜兴市辉煌化学试剂厂等。配得相应饱和KSCN溶液后，再重复实验2，结果与表1相同。可见，KSCN中重金属离子浓度过高导致蛋白质出现沉淀的猜测不合理。 　　实验4 取3支小试管，分别加入4mL蛋白质溶液，向试管A和B中分别逐滴滴加饱和K2SO4溶液、饱和KCl溶液，试管C作对照。试管A中略有浑浊，试管B约半小时后略有浑浊，若继续向以上两试管中加入蒸馏水并不断振荡，重新恢复澄清。 　　实验5 取3支小试管，分别加入4mL蛋白质溶液，向试管A和B中分别逐滴滴加饱和NH4SCN溶液、饱和NaSCN溶液，试管C作对照。试管A出现明显的沉淀，试管B放置10分钟后也逐渐出现浑浊、沉淀，若继续向以上两试管中加入蒸馏水并不断振荡，浑浊现象不消失。 　　实验6 将KSCN、NH4SCN和NaSCN的饱和溶液与蒸馏水分别按体积比1：1，1：3，1：5等稀释后再与蛋白质溶液作用，等待一定时间后也均会出现不同程度的浑浊，若继续加入蒸馏水并振荡，也未见浑浊明显减少。 　　综合以上实验4、5和6现象说明，促使蛋白