荧光法测定药片中维生素B2含量总论.pptVIP

* * 荧光分光光度法测定药片中维生素B2的含量 授课单位：化学与生命科学学院授课 课程名称：仪器分析实验 教 师：陈志兵 荧光分光光度法测定药片中维生素B2的含量 实验目的 学习荧光分光光度法测定药片中维生素B2的分析原理。 掌握荧光分光光度计的操作技术和测定药片中维生素B2 的方法。 掌握Origin绘图软件的使用方法 实验原理 荧光分析法 常温下，处于基态的分子吸收一定的紫外可见光的辐射能成为激发态分子，激发态分子通过无辐射跃迁至第一激发态的最低振动能级，再以辐射跃迁的形式回到基态，发出比吸收光波长长的光而产生荧光。 实验原理 荧光分析法 在稀溶液中，荧光强度IF与物质的浓度c有以下的关系： 当实验条件一定时，荧光强度与荧光物质的浓度成线性关系： 这是荧光光谱法定量分析的理论依据。 a. 与紫外-可见分光度法比较，荧光分析法具有更高的灵敏度。 b. 选择性好。荧光法既能依据发射光谱，又能依据吸收光谱来鉴定物质。 c. 所需试样量少、操作方法简便。 荧光分析法的特点 激发光谱：固定测量波长(选最大发射波长)，化合物发射的荧光强度与激发光波长的关系曲线。激发光谱曲线的最高处，处于激发态的分子最多，荧光强度最大。 荧光光谱 激发光谱 发射光谱：固定激发光波长(选最大激发波长), 化合物发射