生物化学简明教程--第四版-第五章-酶.ppt

酶的别构效应 别构酶(allosteric enzyme)的特点： 有多亚基 有两个中心：活性中心和别构中心 活性中心 别构中心 别构中心 活性中心 具有别构效应(allosteric effect) * 别构调节物(allosteric effector) 能与别构酶结合并能调节其活性的物质 别构调节物的类型 底物或底物类似物 小分子的代谢产物 别构激活剂（正效应物） 别构抑制剂（负效应物） * 协同效应(cooperative effect) 正协同效应 负协同效应 一个效应物分子与别构酶的别构中心结合后，对第二个效应物分子的结合所产生的影响。 * 别构酶举例 大肠杆菌天冬氨酸转氨甲酰酶 （E.coli aspartate transcarbamylase, ATCase） * ATCase催化的化学反应 CO2+Glu+ATP * ATCase活性调节的机理 有催化活性的构象 无催化活性的构象 * +ATP +CTP 别构酶的Ｓ形曲线 [S] V 1/2Vmax--------------------------------------------- * 酶活力的测定 注意事项： 1、测定反应的初速度 2、在一套固定条件下进行 测定方法 * 酶活力（enzyme activity） 在一定条件下，１分钟能转化１μmol底物的酶量称为一个酶单位(U)。 * 酶的比活力（specific activity，也称比活性） 指每mg蛋白质所具有的酶活力，一般用 U/mg蛋白质来表示，可以用比活力来表示酶的纯度。 比活力= 酶活力（U/ml）/蛋白质浓度（mg/ml） 比活力有时也可用每g或每ml酶含多少个活力单位来表示。 * 酶的制备 提取 纯化 保存 思考题： 从肝细胞中提取的一种蛋白水解酶的粗提液300ml含有150mg蛋白质，总活力为360单位。经过一系列纯化步骤以后得到的4ml酶制品(含有0.08mg蛋白)，总活力为288单位，整个纯化过程的收率是多少？ 纯化了多少倍？ * 酶的应用（临床方面） 消化类：胃蛋白酶、胰酶、淀粉酶、纤维素酶、木瓜酶、凝乳酶酶等 抗炎净创类：胰蛋白酶、糜蛋白酶、α淀粉酶、胰脱氧核糖核酸酶等 血凝和解凝类：凝血酶促使血液凝固，防止微血管出血。 纤维蛋白溶解酶的作用是溶解血块，治疗血栓静脉 炎、冠状动脉栓塞等 解毒类：如青霉素酶能够分解青霉素分子中的β一内酰胺环，使变 成青霉噻唑酸，消除因注射青霉素引起的过敏反应。 * Allosteric inhibitors bind specifically to the T state and make it harder for substrate to switch enzyme into the R state. Allosteric activators bind specifically to the R state and pull more of the enzyme into the more active R state. ALLOSTERIC EFFECTORS bind specifically to either the T or the R states. Heterotropic (nonsubstrate) activators bind to and stabilize the R state, while heterotropic inhibitors bind preferentially to the T state. * TT RT RR +S +S TT RR RT +S +S 序变模型(simple sequential model) 齐变模型(concerted model) * Simple sequential model for a tetrameric allosteric enzyme. The binding of a ligand (L) to a subunit changes the conformation of that particular subunit from the T (square) to the R (circle) form. This transition affects the affinity of the other subunits for the ligand. * 2、可逆的共价修饰调节 可逆的共价修饰(covalent modification)方式： 可逆磷酸化(phosphorylation) 可逆腺苷酰化(adenylyl