重组腺病毒介导的ing4对人mcf-7乳腺癌细胞的增殖抑制及化疗增敏作用的实验分析-experimental analysis of recombinant adenovirus mediated ing 4 on proliferation inhibition and chemosensitization of human mcf - 7 breast cancer cells.docxVIP

苏州大学学位论文使用授权声明 本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即： 学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文 的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报 中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社）、中国学术期 刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论 文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位 论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。 涉密论文□ 本学位论文属 在 年 月解密后适用本规定。 非涉密论文□ 论文作者签名： 日 期： 导 师 签 名： 日 期： I I 重组腺病毒介导的  ING4  MCF-7 乳腺癌细胞的增殖抑制及化疗增敏作用的实验研究 中文摘要 对人重组腺病毒介导的 ING4 对人 MCF-7 乳腺癌细胞的增殖 对人 抑制及化疗增敏作用的实验研究 中文摘要 目的：研究重组腺病毒介导的 ING-4（Inhibitor of tumor growth factor 4）基因感 染人 MCF-7 乳腺癌细胞后对后者所起的生长抑制作用及化疗增敏作用。 方法：将搭载有 ING-4 基因的重组腺病毒载体 Ad-ING4 感染人 MCF-7 乳腺癌 细胞，用荧光显微镜观察感染后的 MCF-7 细胞形态学变化；RT-PCR 和 Western-Blot 法检测 ING-4 基因在 MCF-7 细胞中的转录和表达；CCK 法分别测定 ADM、5-Fu、 CTX 对病毒感染前后的 MCF-7 乳腺癌细胞的半数抑制浓度 IC50，以观察其化疗药物 增敏现象。用流式细胞技术检测 ING-4 基因对 MCF-7 细胞的促凋亡作用；半定量 RT-PCR 法检测 ING-4 基因表达对 MCF-7 细胞中相关凋亡基因表达的影响。 结果：搭载有 ING-4 基因的重组腺病毒载体 Ad-ING4 成功感染人 MCF-7 乳腺 癌细胞，并且随着感染作用时间的延长，于荧光显微镜下可见 Ad-ING4 作用下的 MCF-7 乳腺癌细胞变圆、脱落、皱缩、聚集等现象愈加明显，细胞贴壁数量明显减 少；重组腺病毒载体感染 MCF-7 细胞后 ING-4 成功转染入细胞内，RT-PCR 法检测 出其于 MCF-7 细胞内获得表达；蛋白印迹法表明在感染后的 MCF-7 细胞内存在 ING-4 基因相关蛋白的表达；CCK-8 试验表明在有 ING-4 基因表达的情况下，MCF-7 细胞对化疗药物的敏感性有所增强；Ad-ING4 与化疗药物联合使用时对 MCF-7 细胞 的增殖抑制作用更为明显；RT-PCR 检测表明 Ad-ING4 的转染使 MCF-7 细胞的 Bax 表达上升，Bcl-2 与 Survivin 的表达下降，其机制可能与 ING4 降低 Bcl-2/Bax 比值和 抑制 Survivin 的表达有关。 结论：MCF-7 细胞在转染 ING4 基因后，其细胞增殖受到了明显抑制，且对化 疗药物的敏感度更高，更易凋亡，该现象可能是通过改变 Bax,Bcl-2 及 Survivin 表达 水平来实现的。 关键词：ING4 基因，腺病毒载体，MCF-7 人乳腺癌细胞，凋亡。 作 者：吴乙夫 指导老师：董晓强 II II 英文摘要 重组腺病毒介导的  ING4  MCF-7 乳腺癌细胞的增殖抑制及化疗增敏作用的实验研究 对人The growth-inhibitory and enhanced chemotherapy 对人 sensitization effects of recombinant ING4-Adenovirus on MCF-7 breast cancer cells Abstract Objective：To explore the growth-inhibitory effects on the MCF-7 human breast cancer cells of the adenovirus-mediated ING4 gene. Methods:The MCF-7 human breast cancer cells were infected with AdING4 and fluorescence microscope,RT-PCR and Western-Blot analysis were selected to detect the transcription of ING4 gene.Cell growth inhibition and apoptosis was detected by CCK-8 assay and flow cytom