子痫前期患者母血及胎盘组织中htra4 syncytin-1的 表达及意义-expression and significance of htr a4 syncytin - 1 in maternal blood and placenta of preeclampsia patients.docxVIP

中 中 文 摘 要 PAGE 10万方数据 PAGE 10 万方数据 子痫前期患者母血及胎盘组织中 HtrA4、Syncytin-1 的 表达及意义 摘 要 目的：子痫前期（Preeclampsia，PE）是妊娠期特有的疾病，严重危 害母儿健康。全球发病率为3-8%，且各地区发病率呈逐年上升趋势。子 痫前期的发病机制至今尚未完全阐明，研究发现其与细胞凋亡、血管痉挛， 凝血系统激活，炎症反应等密切相关，而这些病理变化集中表现为胎盘的 异常。多数研究认为，子痫前期的病理变化起始于胎盘“浅着床”和胎盘 血管重铸障碍。研究证实多种胎盘来源的蛋白因子的表达异常参与子痫前 期胎盘滋养细胞的功能，如可溶性血管内皮生长因子、胎盘生长因子、 HtrA家族、合胞素等，但极少数被认为是子痫前期病情严重程度的预测指 标。其中，HtrA4又称高温需求蛋白4，是丝氨酸蛋白酶家族成员之一，其 分子量为51kDa。高温时作为蛋白酶降解折叠错误的周质蛋白，低温时显 示蛋白质分子伴侣功能，研究表明HtrA4参与胎盘发育，被认为是早发型 子痫前期可能的预测指标。而Syncytin-1是由人内源性逆转录缺陷病毒 (HERV）家族成员HERV-W编码的包膜蛋白，其分子量为33kDa。高度表 达于胎盘合体滋养细胞层，介导胎盘滋养细胞的融合分化，对胎盘发育具 有重要意义。有研究发现HtrA4通过其PDZ结构域与Syncytin-1的SU亚单 位结合，抑制了滋养细胞之间的融合、分化，造成胎盘浅着床，引发子痫 前期。本研究从检测母血及胎盘组织中HtrA4和syncytin-1的含量变化及其 与临床指标的相关性角度进行研究，探讨其对胎盘滋养细胞融合、分化的 影响，进而加深对子痫前期发病机制的了解，并指导临床诊断和治疗。 方法： 1 研究对象：按照《妊娠期高血压疾病诊治指南（2015）》中重度子 痫前期的诊断标准选取 2014.02 至 2015.05 于河北医科大学第二医院产前 检查和住院的重度子痫前期患者 74 例，发病孕周34 周的早发型子痫前 期（Early-onset preeclampsia，E-PE）组 39 例，34 周的晚发型重度子痫 前期（Late onset severe preeclampsia，LS-PE）组 35 例，同期随机选取 33 例健康孕妇作为对照组。 2 标本采集：所有研究对象在终止妊娠前 3 天内应用彩色多普勒超声 检测脐动脉血流动力学参数：收缩期峰值流速与舒张末期血流速度之比 （S/D）、搏动指数（PI）及阻力指数（RI）。收集所有研究对象分娩前母 血 3ml，离心，取上清液，置于-70℃冰箱保存，待测。胎盘娩出后立即 取胎盘母面近脐带根部直径 3cm 范围内的组织，约 l x l x lcm 大小，生理 盐水冲洗后至 10％福尔马林溶液中室温固定 48h 以上，然后进行脱水、 石蜡包埋等。 3 检验指标及方法：采用彩色多普勒超声测定脐血流动力学参数 S/D、PI、RI；采用酶联免疫吸附试验检测母体血浆 HtrA4 和 Syncytin-1 的表达水平；采用免疫组织化学技术（Immunohistochemistry，IHC）显微 镜下观察胎盘中 HtrA4 和 Syncytin-1 的表达分布；软件进行图像分析得出 平均光密度值（Mean optical Density，MOD）。 4 数据分析：采用 SPSS 21.0 统计软件进行数据分析。计量资料用均 数±标准差（ x ±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采 用 SNK 检验。两变量之间的相互关系采用 Pearson 直线相关性分析。取 α=0.05 作为检验水准，P0.05 为差异有统计学意义。 结果：1 子痫前期患者脐动脉血流 S/D、PI、RI 值升高，与对照组相 比，差异均有统计学意义（P0.05）。早发组 S/D 值显著高于晚发组和对 照组（均 P0.05），差异有统计学意义；早发组 PI 值及 RI 值显著高于晚 发组，且晚发组高于对照组（均 P0.05），差异有统计学意义；2 子痫前 期患者血浆中 HtrA4 表达升高，而 Syncytin-1 表达降低，与对照组相比， 差异均有统计学意义（P0.05）。早发组 HtrA4 表达水平显著高于晚发组， 且晚发组高于对照组（均 P0.05）。早发组 Syncytin-1 表达水平明显低于 晚发组，且晚发组低于对照组（均 P0.05），差异有统计学意义；3 HE 染 色结果：正常妊娠胎盘可见绒毛成熟良好，形态饱满，间质少，绒毛及绒 毛间质的血管丰富，形态正常，合体滋养层细胞核排列较整齐；子痫前期 患者胎盘绒毛成熟不良，绒毛血管平滑肌数量减少，可见玻璃样变，间质 水肿，合体滋养层细胞细胞核排列紊乱；其中早发组胎