第2章节提取分离(天然药化).pptVIP

* TLC 三种溶剂系统为单一斑点,Rf 0.3, 0.5, 0.7 * * UV一致，不一定是一个化合物。如P4的?-蜕皮激素， ?-蜕皮激素 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * CCD（Counter Current Distribution）, DCCC（Droplet Counter Current Chromatography）HSCCC（High Speed Counter Current Chromatography）是一种液-液色谱， * * * * * * * * 硅胶不适合碱性强的生物碱。 * * 干法上样(样品与吸附剂1:2拌样), 湿法上样(用起步溶剂溶解样品,滴加到柱上) * 干法上样(样品与吸附剂1:2拌样), 湿法上样(用起步溶剂溶解样品,滴加到柱上) * 干法上样(样品与吸附剂1:2拌样), 湿法上样(用起步溶剂溶解样品,滴加到柱上) * * 1形成氢键的基团有COOH,Ar-OH, C=O;2如邻羟基苯甲酸;4 如黄酮类. * * * * 葡聚糖凝胶系由分子量一定的葡聚糖及交联剂交联聚合而成. 6.3 根据物质吸附性差异进行分离——吸附色谱的两种操作方式 柱色谱 薄层色谱 二、天然药物有效成分的分离方法 色谱分离过程实验 色谱柱 色谱 混合物 固定相 流动相 色谱分离 二、天然药物有效成分的分离方法 二、天然药物有效成分的分离方法 3.2.1 吸附柱色谱用于分离注意事项： 1）吸附剂用量一般为试样量的30-60倍。 根据实际情况可适当提高至试样量的100-200倍。 2）应尽量选用极性小的溶剂装柱和溶解试样，以利于在吸附柱上形成狭窄的原始谱带。 3）洗脱用溶剂的极性宜逐步提高，但跳跃不能太大。 多用混合溶剂：己烷-苯、苯-乙醚、苯-乙酸乙酯、氯仿-甲醇等。 见P36 表1-8 二、天然药物有效成分的分离与精制 4）为避免发生化学吸附，酸性物质宜用硅胶、碱性物质宜用氧化铝。 分离酸性物质，洗脱剂中加入适量 乙酸或三氟乙酸等； 分离碱性物质，洗脱剂中加入适量 氨或吡啶或二乙胺等； 5）可加压，溶剂系统可通过TLC进行筛选。 一般TLC中展开时Rf 值为0.2?0.3的溶剂系统，可以作为柱色谱分离溶剂系统。 二、天然药物有效成分的分离与精制 3.3 聚酰胺(Polyamide) 是由己酰胺聚合成的一类高分子化合物。 分离原理：主要通过酰胺键与酚羟基、酸、醌等形成氢键，产生吸附作用。吸附力取决于形成氢键缔合的能力。 二、天然药物有效成分的分离与精制 3.3 聚酰胺 ①吸附力与结构的关系 a.形成氢键的基团数目越多, 吸附力越强; b.形成分子内氢键者, 吸附力减少; 二、天然药物有效成分的分离与精制 c.芳香化程度越高或共轭键越多,吸附力越强; 3.3 聚酰胺 ①吸附力与结构的关系 ②溶剂的洗脱能力 水 含水醇醇 丙酮NaOH/H2O甲酰胺二甲基甲酰胺尿素/H2O 二、天然药物有效成分的分离与精制 3.4 大孔吸附树脂(macro-reticular resin) ①组成: 苯乙烯，二乙烯苯和致孔剂 ②分离原理:吸附(范德华力和氢键)和分子筛作用(多孔性结构)　 ③树脂类型:非极性、中极性和极性三种。 非极性：由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称芳香吸附树脂。 中极性：含脂基的吸附树脂。 极 性：含酰氨基、氰基、酚羟基等含氮、氧、硫不同极性功能的吸附树脂。 二、天然药物有效成分的分离与精制 3.4 大孔吸附树脂 ④洗脱剂: H2O 及不同比例的含水醇。 洗脱分离: H2O 洗: 糖,水溶性色素 30% EtOH/ H2O: 极性大的成分 50-75% EtOH: 皂苷类 95% EtOH: 极性小成分 ⑤应用: 除多糖, 水溶性色素, 富集苷类成分 二、天然药物有效成分的分离与精制 4.2凝胶种类: ①葡聚糖凝胶(Sephadex G): 只适于在水中应用, 分离多糖、 蛋白质等. ②羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)： 适用于各类化合物的分离，除具有分子筛的特性外，还起到反相分配色谱的效果。 常用溶剂有甲醇、氯仿-甲醇等。 4.根据物质分子大小差别进行分离—凝胶滤过法 二、天然药物有效成分的分离与精制 一 化合物纯度的鉴定（Identification of Purity） 1. 测熔点: 看熔程 2. 外观结晶色泽与形状: 均一性 3. 色谱法: TLC 三种组成不同