2-蛋白质4 生物化学复习资料.pptVIP

2 蛋白质化学 Prion在病理组织中的纤维状聚合体 血红蛋白和肌红蛋白的氧合曲线 静脉血 动脉血 血红蛋白 肌红蛋白 氧分压 氧饱和度 别构效应(allosteric effect)：又称变构效应，是指寡聚蛋白与配基结合，改变蛋白质构象，导致蛋白质生物活性改变的现象. 一个亚基与氧结合后，引起该亚基构象改变 进而引起另三个亚基的构象改变 整个分子构象改变 与氧的结合能力增加 血红蛋白的别构效应 齐变模式（concerted model）：由于一个底物或别构调节剂的结合，蛋白质的构相在T（对底物亲和性低的构象）和R（对底物亲和性高的构象）之间变换。这一模式提出所有蛋白质的亚基都具有相同的构象，或是T构象，或是R构象。序变模式（sequential model）：一个配体的结合会诱导它结合的亚基的三级结构的变化，并使相邻亚基的构象发生很大的变化。按照序变模式，只有一个亚基对配体具有高的亲和力。 紧张状态 松弛状态 一、一级结构与功能的关系(ρ49) 二、空间结构与功能的关系 1、一级结构的种属差异与分子进化 2、一级结构的变异与分子病 1、核糖核酸酶 2、肌红蛋白和血红蛋白的结构与功能 3、疯牛病 蛋白质构象疾病：若蛋白质的折叠发生错误，尽管其一级结构不变，但蛋白质的构象发生改变，仍可影响其功能，严重时可导致疾病发生。 生物体内的每一个基因均受到来自生物演化的选择压，其结果是每个蛋白质均有其独特（和唯一的）的立体的结构，和生化生理功能。 蛋白质构象改变导致疾病的机理：有些蛋白质错误折叠后相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病，表现为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。 这类疾病包括：人纹状体脊髓变性病、老年痴呆症、亨停顿舞蹈病、疯牛病等。 43%α-helix 30%α-helix 43%β-sheet 一条肽链对应一个特定的空间结构. 这条法则的破坏是灾难性的。导致疯牛病的prion就是一个例子。 疯牛病中的蛋白质构象改变 疯牛病是由朊病毒蛋白(prion protein, PrP)引起的一组人和动物神经退行性病变。 正常的PrP富含α-螺旋，称为PrPc。 PrPc在某种蛋白的作用下可转变成全为β-折叠的PrPsc，从而致病。 PrPc α-螺旋 PrPsc β-折叠 正常 疯牛病 2.1 氨基酸 2.2 肽 2.3 蛋白质的分子结构 2.4 蛋白质结构和功能的关系 2.5 蛋白质的重要性质 2.6 蛋白质的分类 2.7 蛋白质的分离与鉴定 2.5 蛋白质的重要性质 蛋白质的分离与鉴定 两性解离及等电点 胶体性质 沉淀反应 变性与复性 紫外吸收与呈色反应 沉降速度法 盐析分离 离子交换层析 疏水层析 凝胶过滤层析 亲和层析 蛋白质电泳-SDS丙烯酰胺凝胶电泳（SDS） 1、沉降速度法 用光学方法测定界面移动的速度即为蛋白质的离心沉降速度 蛋白质的沉降速度与分子大小和形状有关 沉降系数是溶质颗粒在单位离心场中的沉降速度，用s表示。 一个S单位，为1×10-13秒 相对分子质量越大，S值越大 蛋白质的沉降系数：1～200S 2 凝胶过滤法 (ρ35) 葡聚糖凝胶珠 基于蛋白质分子在大小和形状的差异 3、蛋白质电泳 ——SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法(ρ38) 聚丙烯酰胺凝胶：大小、形状和电荷数量 SDS-聚丙烯酰胺凝胶：大小 带负电（SDS带负电） 荷质比相同（分子大，结合SDS多；分子小，结合SDS少） 棒状 十二烷基硫酸钠 十二烷基硫酸钠 用SDS测定蛋白质的相对分子质量 双向电泳 二、蛋白质的两性解离及等电点 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点(isoelectric point, pI) 。 在不含任何盐的纯水中进行等电点测定，此时测得的等电点称为蛋白质的等离子点。 一级结构(ρ41） : 氨基酸序列和二硫键的位置 二级结构(ρ57）：主链规律的空间排列 (α-螺旋, β-折叠) 超二级结构 结构域（domain） 三级结构(ρ70）：所有原子空间位置 四级结构(ρ83）：多肽链间的相互关系 维持蛋白质空间结构稳定的因素 上节回顾 2.1 氨基酸 2.2 肽 2.3 蛋白质的分子结构 2.4 蛋白质结构和功能的关系 2.5 蛋白质的重要性质 2.6 蛋白质的分类 2.7 蛋白质的分离与鉴定 2.4 蛋白质结构与 功能的关系 一、一级结构与功能的关系(ρ49) 二、空间结构与功能的关系 1、一级结构的种属差异与分子进化 2、一级结构的变异