花青素对大豆蛋白质二级结构影响多重光谱分析.PDFVIP

２０１８年 ６月 农 业 机 械 学 报 第 ４９卷 第 ６期 ｄｏｉ：１０．６０４１／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００１２９８．２０１８．０６．０４４ 花青素对大豆蛋白质二级结构影响的多重光谱分析 朱　颖　王中江　李　杨　齐宝坤　隋晓楠　江连洲 （东北农业大学食品学院，哈尔滨 １５００３０） 摘要：以大豆分离蛋白 花青素复合体系为研究对象，综合利用多重光谱技术对其进行分析。利用荧光光谱探究大 豆分离蛋白和花青素间的相互作用方式，采用同步荧光光谱和紫外 可见光谱探究花青素对大豆分离蛋白氨基酸 残基微环境的影响，从而得出花青素对大豆分离蛋白构象的影响，再采用傅里叶变换红外光谱法和圆二色谱法研 究花青素对大豆分离蛋白二级结构的影响。结果表明：花青素对大豆分离蛋白有较强的荧光猝灭作用且为静态猝 ４ ４ 灭，其中，花青素与大豆分离蛋白在 ２９８、３０６、３１４Ｋ时相互作用的表观结合常数分别为 ３３４３×１０、４５０７×１０、 ４ ５５２５×１０Ｌ／ｍｏｌ，对应的结合位点数分别为０９１７８、０９５４６、０９３８１。热力学数据分析结果表明：花青素与大豆 分离蛋白反应的作用力主要是疏水相互作用；同步荧光光谱和紫外 可见光谱结果表明花青素改变了芳香氨基酸 残基在空间结构中所处的微环境，使大豆分离蛋白的分子构象发生改变，且同步荧光光谱显示花青素与大豆分离 蛋白中色氨酸残基发生相互作用，使其周围的疏水作用减少。傅里叶变换红外光谱和圆二色谱结果表明花青素引 起大豆分离蛋白的二级结构发生改变。 关键词：大豆分离蛋白；花青素；荧光光谱；紫外 可见光谱；傅里叶变换红外光谱；圆二色谱 ＋ 中图分类号：ＴＳ２０１２ １；Ｏ４３３４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００１２９８（２０１８）０６０３６８０７ ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＡｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓｏｎｔｈｅＳｅｃｏｎｄａｒｙＳｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆ ＳｏｙｂｅａｎＰｒｏｔｅｉｎＩｓｏｌａｔｅｂｙＭｕｌｔｉｐｌｅｘＳｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ ＺＨＵＹｉｎｇ　ＷＡＮＧＺｈｏｎｇｊｉａｎｇ　ＬＩＹａｎｇ　ＱＩＢａｏｋｕｎ　ＳＵＩＸｉａｏｎａｎ　ＪＩＡＮＧＬｉａｎｚｈｏｕ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，ＮｏｒｔｈｅａｓｔＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ１５００３０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｓｏｙｂｅａｎｐｒｏｔｅｉｎｉｓｏｌａｔｅ ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｃｏｍｐｌｅｘｓｙｓｔｅｍｗａｓｕｓｅｄａｓｔｈｅｏｂｊｅｃｔｏｆｓｔｕｄｙ．Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｓｏｙｂｅａｎｐｒｏｔｅｉｎａｎｄａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｗａｓｅｘｐｌｏｒｅｄｂｙｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ， ＵＶ Ｖｉｓｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ，Ｆｏｕｒｉｅｒｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｆｒａｒｅｄｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙａｎｄｃｉｒｃｕｌａｒｄｉｃｈｒｏｉｓｍ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆ ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓｏｎｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｓｏｙｂｅａｎｐｒｏｔｅｉｎｉｓｏｌａｔｅｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙＦｏｕｒｉｅｒｔｒａｎｓｆｏｒｍ ｉｎｆｒａｒｅｄ ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙａｎｄｃｉｒｃｕｌａｒｄｉｃｈｒｏｉｓｍ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｏｎｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｓｏｙｂｅａｎｐｒｏｔｅｉｎｉｓｏｌａｔｅ ｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙＦｏｕｒｉｅｒｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｆｒａｒｅｄｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙａｎｄｃｉｒｃｕｌａｒｄｉｃｈｒｏｉｓｍ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｈａｄｓｔｒｏｎｇｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕｅｎｃｈｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｎｓｏｙｂｅａｎｐｒｏｔｅｉｎｉｓｏｌａｔｅｉｎａｓｔａ