环孢霉素A对小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化影响及调控机制.docVIP

环孢霉素A对小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化影响及调控机制 　　[摘要]目的 探讨环孢霉素A（CSA）对小鼠胚胎干细胞（ESCs）向心肌细胞分化的影响及调控机制。方法 应用分阶段胚胎干细胞向心肌细胞的分化系统，设ESCs自发组和CSA诱导组，用细胞免疫组织化学和流式细胞仪（FACS）评估心肌细胞分化率以及计数。细胞免疫化学检测CSA诱导出的心肌细胞标志物的表达。在ES细胞分化的不同阶段添加CSA，观察CSA是否特异地作用于某一特定的分化阶段。分别添加另外一种免疫抑制剂也是钙调磷酸酶抑制剂他克莫司（FK506）和T细胞核因子（NFAT）抑制剂11R-VIVIT，与添加CSA比较，比较各组的心肌细胞分化率。结果 ESCs自发组的心肌细胞分化率为（6.00±0.05）%，CSA诱导组为（60.00±0.08）%，?勺楸冉希?差异有统计学意义（P0.05），且诱导生成的心肌细胞具备心肌细胞特有的特征。CSA特异性地作用于中胚层干细胞，促进其分化成心肌干细胞；CSA强力促进中胚层干细胞分化成心肌细胞增多，相反分化成的上皮细胞减少；添加FK506和11R-VIVIT后没有出现类似CSA的促心肌分化作用。结论 CSA特异地作用于中胚层干细胞，通过非NFAT径路，能够强力诱导ESCs向心肌细胞分化。 　　[关键词]环孢霉素A；心肌干细胞；胚胎干细胞；心肌细胞；分化 　　[中图分类号] R332