白藜芦醇对肝癌细胞RAFFS1A基因表达及甲基化影响.docVIP

白藜芦醇对肝癌细胞RAFFS1A基因表达及甲基化影响 　　摘要：目的 探讨表白藜芦醇（Resveratrol，Res）对肝癌细胞RASSF1A甲基化的影响。方法 体外培养肝癌细胞系HepG2，用10 μmol/L和20 μmol/L Rev处理后，采用Western blot和实时定量PCR分别检测RASSF1A基因蛋白和mRNA表达；高效液相色谱- 电喷雾质谱检测RASSF1A甲基化，同时采用MTT检测MCF-1细胞增殖。结果 HepG2细胞基础状态下RASSF1A表达水平较低，而经10 μmol/L 和30 μmol/L Rev处理后，能显著增强RASSF1A蛋白和mRNA的表达。高效液相色谱- 电喷雾质谱结果显示，30 μmol/L Rev处理HepG2细胞后，与对照组相比， RASSF1A启动子甲基化水平降低至36%，全基因组甲基化水平降低44%。此外，10 μmol/L和20 μmol/L Rev作用后，HepG2细胞的存活率降低至39%和23%。结论 Rev能上调RASSF1A基因表达，降低细胞内甲基化水平，从而可能发挥对HepG2细胞生长抑制作用。 　　关键词：肝癌；Ras相关区域家族1A；甲基化 　　肝细胞癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一[1， 2]。近年来DNA甲基化在肝癌的发病过程中日益受到重视，在DNA甲基转移酶（DNMTs）的作用下，胞嘧啶转化为5-