221《动物细胞培养和核移植技术》.ppt

9、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答： 1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自______________________。 （2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ，然后用 酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是 。 动物胚胎或幼龄动物 剪碎 胰蛋白 使细胞与培养液充分接触，便于培养 （3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有 ________________等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第 代，到这时的培养称为__ 。 （4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用 处理，然后配置成 ， 再分装。 动物血清 10 原代培养 胰蛋白酶 细胞悬液 * 本资料来自于资源最齐全的２１世纪教育网 * 本资料来自于资源最齐全的２１世纪教育网 2.2 动物细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 阳江市第三中学高二生物备课组编制（2014年4月） 问题讨论: 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人呢？ 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植. 动物细胞工程常用的技术手段： 动物细胞培养、 动物体细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 思考： 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养、 植物体细胞杂交 强调： 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 1.概念： 2.原理： 细胞增殖 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（取材） 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 （分解细胞间的蛋白） 原代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 细胞株 细胞系 动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质 遗传物质未改变 遗传物质已改变 （一）过程 剪碎 1.有关概念 悬液中分散的细胞悬浮液生长一段时间之后，大部分细胞很快就贴附在培养瓶内壁生长，称为细胞贴壁。又称贴壁生长。 贴壁细胞生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖。 (2)接触抑制： (1)细胞贴壁： 通常将动物组织被胰蛋白酶或胶原蛋白酶 消化后的细胞初次培养，称为原代培养。 将原代细胞（贴满瓶壁）重新用胰蛋白酶等处理，分瓶继续培养，让细胞继续增殖，称为传代培养。 (3)原代培养： (4)传代培养： 　 (5)细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 (6)细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变， 具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬浮液 细胞株 细胞系 细胞增殖能力强 无限传代 去掉组织间蛋白 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 1.无菌、无毒的环境 2.全部的营养物质 3.适宜的温度和PH值 4.必要的气体条件 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） （糖、氨基酸、无机盐、维生素、血浆、动物血清等） 保证细胞顺利的生长增殖 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） （二）动物细胞培养的条件 维持培养液的PH 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植株 培养结果 获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 回顾 1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？ 2.如何将动物组织分散成单个的细胞呢？ 3.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质 是什么成份？ 细胞所需营养容易供应，其代谢废物容易排出 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 胰蛋白酶水解蛋白质。 细胞间物质的成份主要是蛋白质。 4.能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 5.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器