第33章蛋白质生物合成.pptVIP

原核细胞 核糖体（70S） 真核细胞核糖体（80S） 亚基 大亚基（50S） 大亚基（60S） 小亚基（30S） 小亚基（40S） rRNA 约60~65% 约55% 16S（小亚基中） 18S（小亚基中） 5S、23S（大亚基） 5S、5.8S、28S （大） 蛋白质 21种（小亚基） 33种（小亚基） 34种（大亚基） 约50种（大亚基） 核糖体的rRNA分布在内部，蛋白质分布在外表，核糖体的功能主要由rRNA来完成，蛋白质起辅助作用。 （一）反密码子 Crick提出密码子与反密码子的配对规律： 1、tRNA的反密码子通过碱基互补来识别密码子，两RNA链反向平行配对。 2、密码子鱼贩密码子配对时具有摇摆型：当反密码子的第一个碱基为C 或A时（与密码子的第三个碱基配对），配对是专一的；当第一个碱基为U或G时，可阅读两种不同的密码子，反密码子中的U可与密码子中的G和A配对；G可与C和U配对；当第一个碱基为次黄嘌呤（I），它可以和密码子中的U、C或A配对。 3、密码子与反密码子配对的摇摆性说明，一种tRNA未必只携带一种氨基酸。为氨基酸编码的密码子有61组，最少需要32种tRNA来翻译。 4、如果一种氨基酸有多个tRNA携带，这些携带相同氨基酸而反密码子不同的一组tRNA叫同功受体tRNA，在书写时，将所携带的氨基酸写在右上角，如tRNAAla。 （二）反密码子发生点突变 自然界中具有回复突变的现象，回复突变的原因有很多，其中有一种回复突变与tRNA上的反密码子发生点突变有关。 如果由于基因中部突变使得mRNA中部GAG(谷）突变为UAG（终止），多肽合成中途停止，产物失去生物学活性，这种突变叫无义突变，产物无生物学意义。 如果tRNATyr（Tyr密码子是：UAU、UAC）的反密码子由3/-AUG-5/突变为3/-AUC-5/，就可以将mRNA的终止信号读成酪氨酸了，使得多肽链合成继续，所合成的多肽，仅酪氨酸处发生改变，这样的突变体，常具有部分或全部的生物学功能。 这说明反密码子改变，也会引起性状改变。 （二）多肽链合成起始 1、起始氨基酸——fMet-tRNA 大肠杆菌起始氨基酸为甲酰甲硫氨酸（fMet）。有专门的tRNA携带。fMet由甲酰化酶催化Met-tRNA生成的，由甲酰四H叶酸提供甲基。 2、起 始（分三步进行） 细菌多肽合成的起始需要的条件是： （1）30S核糖体亚基，含有16S RNA （2）mRNA （3）fMet-tRNA （4）起始因子：IF-1，IF-2和IF-3 （5）GTP （6）50S核糖体亚基 （7）Mg2+ 起始复合物形成分三个步骤 步骤1:形成 30S-mRNA-IF-3-IF-1. 步骤2：30S前起始复合物。即IF-2-30S-mRNA-fMet-tRNA 步骤3：70S起始复合物的形成, 即30S-50S-mRNA-fMet-tRNA起始复合物。 3、真核细胞起始与原核细胞的类似，有5点不同: （1）起始氨基酸是甲硫氨酸 （2）起始因子有10多个，eIF-2(e表示真核生物)是最要的一种,它与GTP和Met-tRNA形成三元复合物. （3）真核细胞的mRNA无SD序列，真核生物不存在SD序列，但在mRNA5/-端有核糖体结合部位（RBS） （4）Met-tRNA先与40S亚基结合。 （5）核糖体与mRNA的核糖体结合部位结合之后,40S亚基在起始因子帮助下。通过一种类似于扫描的机制向3/方向移动来寻找起始密码。mRNA5/端的帽子结构，对核糖体与mRNA 的识别与结合具有一定的作用。 2、肽在多肽链上每增加一个氨基酸都需要经过进位，转肽和移位三个步骤。 （1）进位：与密码子所对应的氨酰-tRNA，首先与含有1个GTP的EF-Tu-结合，形成氨酰-tRNA-EF-Tu-GTP复合物，该复合物再结合到核糖体的A位点，称为进位 （2）转肽：转肽--肽键的形成，P位上的氨基酸提供α-COOH基，与A位上的氨基酸的α-NH2形成肽键，肽链合成方向为N→C。 （3）移位：二肽位于A位，P位上的tRNA空载而脱落，核糖体沿着mRNA由5/向3/端方向移动一个密码单位，移位需要EF-G，GTP和Mg2+的参加。 信号肽的功能是引导核糖体与内质网结合，引导新合成的肽链进入内质网腔，然后肽链边合成边进入内质网腔中，经内质网腔的初