脉络宁对大鼠肢体缺血再灌注损伤保护作用.docVIP

脉络宁对大鼠肢体缺血再灌注损伤保护作用 　　摘要：目的 探讨脉络宁对大鼠肢体缺血再灌注损伤的保护作用。方法 将36只健康雄性，体重（210±20）g的Wistar大鼠随机分为空白组、缺血再灌注组、脉络宁组，每组12只。建造肢体再灌注损伤模型，检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）的活性，检测丙二醛（MDA）的含量，光镜下观察骨骼肌组织结构变化。结果 缺血再灌注组与空白组比较，血清SOD活性降低（P0.05）。光镜下肌纤维肿胀减轻，空泡基本消失，横纹结构部分恢复。结论 脉络宁能够明显减轻组织肿胀，对肢体缺血再灌注损伤起保护作用。 　　关键词：脉络宁；缺血再灌注；超氧化氧歧化酶；丙二醛 　　中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672 　　临床上血栓形成、外伤、急性动脉栓塞、各种胸腹手术、取栓手术、血管重建、休克治疗后、器官移植等不可避免引起器官组织血流阻断，造成器官、组织缺血，缺血器官、组织内会有大量的氧自由基产生， 动脉血流恢复后，它们随血液循环遍布全身，而氧自由基能够调节、控制白细胞与内皮细胞黏附因子之间的表达，促使白细胞和内皮细胞之间的黏附， 从而使白细胞游出， 释放大量炎症介质、水解酶和氧化酶等生物酶类， 破坏内皮细胞[1]，使组织损伤加重。各种原因所造成的急性肢体缺血作为最常见外周血管疾病之一，死亡率高达25%，而存活者当中截肢率高达20%[2]，目前对缺血再灌注损伤没有特别有效的方法，因此很有必要找到一种有效治疗缺血再灌注损伤的药物。有文献证明脉络宁在心脑血管方面有一定的疗效[3]，然而脉络宁在肢体缺血再灌注损伤方面的治疗作用鲜有报道。本研究旨在研究脉络宁是否对肢体缺血再灌注损伤有保护作用。 　　1 材料及方法 　　1.1 实验动物分组及模型建立 健康雄性Wistar大鼠36只，体重（210±20）g，随机分为空白组、缺血再灌注组、脉络宁组，每组12只。术前大鼠禁食12 h，禁水6 h，麻醉前每只大鼠给予腹腔注射脉络宁1 mL，空白组和缺血再灌注组腹腔注射同等剂量生理盐水。采用乌拉坦（40 mg/100 g）腹腔注射麻醉，麻醉满意后15 min后行腹部正中切口，进入腹腔，剪开后腹膜，钝性分离出腹主动脉，在髂总动脉分叉处上方0.5 cm 处，用无创动脉夹夹闭腹主动脉，以阻断平面以下管腔变扁平及动脉搏动消失为缺血造模成功，关腹。2 h后开腹，取下血管夹，血管夹处以下腹主动脉有搏动后关腹腔，恢复腹主动脉血流4 h，空白组步骤基本同缺血再灌注组，但不做腹主动脉阻断。 　　1.2 药物与试剂 脉络宁，金陵药业股份有限公司南京金陵制药厂，批准文号：国药准字超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。 　　1.3 检测项目和标本制作 　　1.3.1 血清SOD、MDA的测定 各组大鼠于再灌注4 h后从下腔静脉采血2 mL，以3 000 r/min离心10 min后取血清，装入EP管中，-40 ℃冻存备用。MDA的检测采用硫代巴比妥酸法（TBA法），SOD的检测采用黄嘌呤氧化酶法。 　　1.3.2 制作石蜡切片与光镜观察 采血结束时迅速取大鼠后肢腓肠肌组织，常规HE染色。 　　1.4 统计学处理 所得实验数据用统计软件SPSS 13.0进行分析，统计描述用均数±标准差（x±s）表示，各组数据均服从正态分布，进行方差齐性检验，采用单因素方差分析的单向分类的方差分析（OneWay ANOVA）及LSD检验。 　　2 结 果 　　2.1 脉络宁对血清SOD活性和MDA含量的影响 缺血再灌注组与空白组比较，血清SOD活性降低（P0.05）。详见表1。 　　2.2 各组大鼠骨骼肌病理改变 光镜下观察大鼠腓肠肌形态改变：空白组纵切面上肌纤维染色均匀，横纹清晰，肌纤维未见坏死及炎细胞浸润；缺血再灌注组纵切面上肌纤维体积增大，染色变淡，有不同程度肿胀，可见空泡，可见部分横纹；脉络宁组肌纤维肿胀减轻，空泡基本消失，横纹结构恢复。 　　3 讨 论 　　缺血再灌注损伤的研究历来备受临床工作者尤其是外科医生的重视，随着介入技术的发展，医源性血管创伤的并发症相对增多，然而，众所周知，减轻此类损伤最有效的办法是尽量缩短缺血时间，在实际工作当中，部分治疗的缺血时间不好控制，从而导致一些患者因缺血时间过长丧失治疗机会，一些患者因术后血流动力学改变而治疗失败，增加了此类损伤的致死率和致残率。防治肢体再灌注损伤，设法减轻肌肉缺血损伤的程度，对挽救肢体，降低截肢率，恢复肢体功能具有很重要的意义，因此在尽量缩短缺血时间的同时，能找到一种有效辅助治疗缺血再灌注损伤肢体的药物很有必要。 　　本实验中缺血再灌注组与空白组相比，SOD活性